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实验设计: 干旱实验体系标准
内容： 一、材料：拟南芥二、基因型：WT、OE 二、检测部位：保卫细胞三、检测指标：Ca2+、K+、H+ 四、处理： 1. 对照 2. 自然干旱胁迫10天五、具体方案定点检测5分钟，8重复/组测试液：2.0mM KCl+0.1mM CaCl2+5.0mM MES，pH6.0（可测K、Ca、H、Cl）平衡时间：如果检测气孔打开的，照光（10000~20000lux）平衡1h ...
实验设计: 柚木根有无接菌处理
内容： 【方案一：预处理（长时处理）】材料：柚木（不接种真菌、接种真菌1、接种真菌2）处理：干旱胁迫（自然干旱）检测指标：Ca2+、H2O2 检测位点：根重复：8 具体实验内容自然干旱10d（时间点可调整）后，定点检测柚木根部5min 【方案二：实时处理】材料：柚木（不接种真菌、接种真菌1、接种真菌2）处理：干旱胁迫（20%PEG模拟干旱胁迫，浓度可调整）检测指标：Ca2+、H2O2 检测位点：根重复：8 具体实验内容 10%PEG处理前检测5min，10%PEG处理后检测10min 实验目的：干旱胁迫条件下，研究接种丛枝菌根真菌能否促进植物根系过氧化氢的外排以减轻植物的氧化胁迫 ...
实验设计: 油菜叶绿体
内容： 实验1—预处理目的：观察NaHCO3长时处理效应，以及外源钙对碱胁迫下离子平衡的影响。检测样品：油菜样品品种：碱敏感品种、耐碱品种检测部位：叶绿体、叶肉细胞处理方式： CK 75mM NaHCO3 75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2 75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂（根施：0.4mM，叶面喷施：0.04mM）重复数：8 检测指标：Na+、Ca2+、K+ 具体方案 75mM NaHCO3、75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2、75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂处理3d/5d/10d/20d（时间点可调整，20d是原计划时间，电话里说了需要往前调整）后定点检测10 min。参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/jgVHMzXIJp8mEvsuT6Ny3w https://mp.weixin.qq.com/s/hoDMtVPbC0jxqVZnvs7kRA 实验2—实时处理目的：观察NaHCO3的短时处理效应，及外源钙对碱胁迫下离子平衡的影响。检测样品：油菜样品品种：碱敏感品种、耐碱品种检测部位：叶绿体、叶肉细胞处理方式： CK 75mM NaHCO3 75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2 75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂（根施：0.4mM，叶面喷施：0.04mM）重复数：8 检测指标：Na+、Ca2+、K+ 具体方案 75mM NaHCO3处理12h/24h/3d（时间点可调整）后，CaCl2或Ca2+螯合剂实时处理。CaCl2或Ca2+螯合剂处理前检测3min，CaCl2或Ca2+螯合剂处理后检测10min。 CaCl2或Ca2+螯合剂处理6h/12h/24h/3d（时间点可调整）后，75mM NaHCO3实时处理。75mM NaHCO3处理前检测3min，75mM NaHCO3处理后检测10min。 NaHCO3+Ca2+螯合剂同时加入会产生沉淀，因此不采用同时处理的方法。 ...
实验设计: 拟南芥保卫细胞瞬时ABA
内容： 材料：拟南芥基因型：WT、突变体检测部位：保卫细胞检测指标：Ca2+ 处理：10μM ABA实时处理具体方案： WT：10μM ABA处理前检测5min，10μM ABA处理后检测20min（3个重复，用于确定信号变化比较大的时间段） 10μM ABA处理前检测5min，10μM ABA处理后检测10min（5个重复，假如根据上面的三个重复确定数据在加药后10min可以稳定，则之后的样品都检测10min）突变体：10μM ABA处理前检测5min，10μM ABA处理后检测10min（8重复） ...
实验设计: 油菜根低温瞬时
内容： 材料：两个油菜品种检测指标：Ca2+ 检测部位：根尖分生区（分生区Ca2+信号最明显）处理：对照、实时0℃低温处理对照：油菜正常状态下的Ca2+信号变化实时0℃低温处理：检测完正常状态下的Ca2+信号变化后，实时把检测环境变成0℃，检测时间不少于15分钟（根据实验的实际情况决定检测时长，以实际检测到的稳定Ca2+信号时间为准） ...
实验设计: 拟南芥根盐胁迫
内容： 周四早上：先进行周五早上盐胁迫苗子的处理（需要NaCl胁迫24小时）周五：上午对前一天NaCl处理的苗子进行测试实验1、基因A对盐胁迫介导的跨膜离子流动的影响，共12个样品检测样品：拟南芥检测部位：根检测样品品种：A和B（*2）检测指标：Na+外排处理方式：正常培养5~6天后，100mM NaCl处理24h后，放入测试液。检测位点：扫点：根毛区、分生区、伸长区（*3），优先测根毛区。测定时间：对照组：检测3分钟（三个区域测同一棵苗，进行扫点）盐胁迫组：测5分钟（三个区域测同一棵苗，进行扫点）重复数：3（*3）处理液：NaCl（100mM），pH5.8测试液：NaCl（0.5mM），pH5.8 实验2、基因A对冷胁迫介导的跨膜离子流动的影响，共12个样品检测样品：拟南芥检测部位：根检测样品品种：A和B（*2）检测指标：Ca2+ 处理方式：正常培养后冷胁迫瞬时处理检测位点：分生区、伸长区（*2），优先测分生区。测定时间：处理前：检测3分钟4℃处理瞬时处理后：检测10分钟（处理前处理后测同一棵苗）重复数：3（*3）测试液：0.5 mM CaCl2，pH5.8低温测试液：0.5 mM CaCl2，pH5.8 ...
实验设计: 拟南芥根Ca TM和DMSO预处理瞬时实验
内容： 【实验一：实时处理】材料：6日龄拟南芥基因型：WT、突变体三、检测指标：Ca2+ 四、检测位点：根分生区（过渡区）五、重复：8 【具体方案】对照组：5 mg/L DMSO 处理前检测5min，5 mg/L DMSO实时处理后检测10 min 处理组：5 mg/L TM处理前检测5min，5 mg/L TM实时处理后检测10 min 备注：对照组、处理组能否只检测一组药品处理前的样品【实验二：预处理】材料：6日龄拟南芥基因型：WT、突变体三、检测指标：Ca2+ 四、检测位点：根分生区（过渡区）五、重复：8 【具体方案】 TM处理0h（对照）、3h、6h后定点检测5min ...
实验设计: 梨果皮CaCl2处理
内容： 【方案一】材料：梨果实检测部位：果皮（在注射孔周围取样，检测靠近果肉的那一侧）检测指标：Ca2+（流速）、H2O2（流速）处理：注射空载转基因1 转基因1+2%CaCl2浸泡5s 转基因2 转基因2+2%CaCl2浸泡5s 2%CaCl2实时处理具体方案： 1、2、3、4、5组处理定点检测10分钟，8重复/组 6组处理2%CaCl2实时处理后持续监测15分钟，8重复/组测试液：0.01mM CaCl2，pH6.0 【方案二】材料：梨果实检测部位：果皮（在注射孔周围取样，检测靠近果肉的那一侧）检测指标：Ca2+（检测果实内部质外体浓度）、H2O2（浓度）处理：注射空载转基因1 转基因1+2%CaCl2浸泡5s 转基因2 转基因2+2%CaCl2浸泡5s 具体方案：定点检测，8重复/组测试液：0.01mM CaCl2，pH6.0 ...
实验设计: 番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容： 实验1—IAA、H2O2、H+、Ca2+流速检测样品：番茄检测部位：叶肉细胞检测样品品种：AC 检测指标：IAA、H2O2、H+、Ca2+ 处理方式：常温+光照（光照持续伴随样品）常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 4℃低温瞬时+光照（光照持续伴随样品） 4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h+常温+光照（光照持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h+4℃低温瞬时+光照（光照持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品）检测位点：叶肉细胞定点检测测定时间： a、b、e、f组定点检测5min c、d、g、h组检测20min（先看前2-3个样品的数据稳定情况再进行时间调整）重复数：8 测试液IAA、H2O2、H+、Ca2+：0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH ...
实验设计: 番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容： 实验1—H+、Ca2+流速检测样品：番茄检测部位：叶肉细胞检测样品品种：AC 检测指标：H+、Ca2+ 处理方式：常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品）检测位点：叶肉细胞定点检测测定时间： a、c组定点检测5min b、d组检测15min （现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到15min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。）重复数：8 测试液 H+、Ca2+：0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0 实验3—Ca2+流速检测样品：番茄检测部位：叶肉细胞检测样品品种：沉默A、沉默B、沉默C、沉默D、沉默E 检测指标：Ca2+ 处理方式：常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h+常温+黑暗 27mM ...
实验设计: 指标选取
内容： 目前能够测定的指标：Ca2+、H+、Na+、K+、Cl-、Mg2+、Cd2+、Cu2+、Pb2+、NH4+、NO3-、IAA、O2、H2O2 医学相关生理功能检测指标医学相关生理功能 H+ 组成胞膜离子交换蛋白Na+-H+交换泵（NHE），调节pHi、稳定细胞容量（Na+净增，提高渗透压）、影响Ca2+转运、使肿瘤细胞抗凋亡，与心血管疾病、内分泌疾病、肿瘤、肾脏疾病均相关H+门控离子通道，研究离子移动（全细胞膜片钳法） Ca2+ Ca2+通过线粒体通路、死亡受体通路和内质网通路，经信号转导调控细胞凋亡参与细胞电生理作为凝血因子，参与凝血过程参与肌肉(包括心肌、平滑肌)收缩、纤毛运动、阿米巴运动、白细胞吞噬，细胞分裂、受精等过程参与突触神经递质合成与释放、蛋白激素合成与分泌，代谢以及细胞内外酶的激活和释放胞内Ca2+增加，细胞功能异常、减退或衰竭引起内质网应激（ERS）反应性凋亡的起始信使。内质网Ca2+紊乱引起神经细胞的损伤和兴奋性中毒（AD的发病机制）、血管病变异常的关键因素，与糖尿病、肿瘤密切相关细胞Ca2+升高与休克组织损伤相关（LSCM结合荧光探剂标记检测）血、尿Ca浓度高低可预测妊高症（用于产前诊断）神经元胞内Ca2+参与疼痛信息的调控（LSCM测定胞内外Ca2+浓度） K+ 血K+明显增加，可作为扼颈窒息死亡的佐证（用于法医鉴定）参与细胞内正常的新陈代谢与Na+一起维持细胞体积、渗透压和酸碱平衡保持神经肌肉系统的应激性，过高时神经肌肉高度兴奋、过低时陷入麻痹与Ca2+一起维持心肌的正常功能K+流失会引发癌症 Na+ 与Cl-一起维持细胞外液渗透压参与调解酸碱平衡神经细胞受到刺激产生兴奋主要是由于Na+内流引起膜电位改变而产生的Na+是DNA不稳定因子，能破坏双螺旋间氢键，促进遗传信息开放 Cl- 维持酸碱平衡Cl-转运失调导致囊胞性纤维症 NH4+NO3- N是有机化合物组成成分，以蛋白质形式存在 Mg2+ 参与平滑肌收缩调节Na+、K+、Ca2+的转运，与高血压相关人体内多种酶的激活剂阻止Ca2+细胞内流，天然的Ca2+拮抗剂抑制自由基的生成，促进自由基的清除抗心律失常、调节血管张力而影响血压参与葡萄糖代谢，维持胰岛素内稳态通过抑制细胞膜上的Ca2+通道阻止细胞外Ca2+内流，从而阻止血管收缩作用于内质网和肌浆网中的三磷酸肌醇受体，抑制其Ca2+释放，胞内Ca2+浓度下降，抑制血管收缩增强内质网和肌浆网Ca2+ ATP酶活性，从而增强内质网与肌浆网吸收Ca2+，降低细胞内Ca2+浓度，抑制血管收缩激活Na+-K+-ATP酶，维持细胞内电解质平衡拮抗兴奋性氨基酸，如谷氨酸、天冬氨酸等，与癫痫发作有关一切能量的产生，DNA及RNA的合成，各种膜的形成也均依赖Mg2+参与骨及细胞形成等的一切生长过程与蛋白质合成、脂肪和糖代谢，氧化磷酸化、离子转运、神经冲动的产生和传导、肌张力和肌力等均有密切关系 Cd2+Pb2+Cu2+ Cu：维持人体正常生命活动所必需的微量元素，对于婴儿生长、脑组织发育、机体免疫等具有重要作用人体中肝铜蛋白、脑铜蛋白、血浆铜蓝蛋白的成分细胞色素C氧化酶（呼吸链关键酶之一）的成分之一Cu/Zn超氧化物歧化酶的辅因子生物合成儿茶酚胺途径的关键酶-多巴胺-β-羟化酶的重要组成部分赖氨酸氧化酶和酪氨酸酶的组成成分Cu直接或间接参与AD的病理过程 O2 维持生命的重要能源维持机体免疫功能活力的关键物质维持机体正常新陈代谢被血红蛋白运送到身体各部分组织中，与其他物质发生氧化反应分解身体中的有毒有害物质 H2O2 促肿瘤：抑制细胞DNA损伤后的修复；形成DNA碱基加成物引起细胞突变或死亡；阻断细胞间缝隙通信连接；影响正常细胞内信号转导；改变细胞粘附特性，促进恶性细胞转移；促进肿瘤细胞表达血管内皮生长因子抗肿瘤：过氧化氢所产生的羟自由基引起DNA单链断裂，核酸碱基加成物等可以破坏肿瘤细胞DNA的合成和表达，引起细胞凋亡或坏死。引起血管损伤的首要主要成分刺激胞内信号转导过程，影响转录因子的活性、基引表达、肌肉收缩及细胞的生长、趋化作用和凋亡过程植物相关生理功能检测指标植物相关生理功能 H+ 作为质子泵，控制细胞内环境pH；同时产生电化学梯度，促进离子及分子的运输泌H+酸化细胞壁，促进细胞伸长生长控制胞内pH变化打破种子休眠参与根、根毛和花粉管的极性形成酵母生长的限速因子 Ca2+ 细胞延伸调节膜的渗透性Ca2+昼夜波动模型Ca2+通道激活调控损伤反应Ca2+振荡激活损伤基因抵御胁迫避免出现免疫反应与NH4+、H+、Na+等拮抗低Ca引起植物生理病害活化酶反应信号传导 K+ 参与植物的氮代谢及脂肪代谢以及蛋白质合成，活化多种酶促进糖的合成与转运参与渗透调节、中和阴离子的负电荷，增进根系吸水控制细胞膜的极化促进光合作用及同化产物的运输增强植物抗逆性（干旱、霜冻、水淹、病虫害、倒伏）、提高作物产量、改善作物品质K+通道：Shaker家族、KCO(TPK)通道K+转运体：KUP/HAK/KT、HKT等 Na+ 增加原生质胶体的亲水性和溶胶作用维持活力、增强抗性 Cl- 促进K+、NH4+的吸收调节细胞渗透压、平衡阳离子活化光合作用相关酶类，促进水裂解、释放氧气促进细胞分裂 NH4+NO3- 氮素吸收转运、代谢参与酶的构成，影响酶活性影响光合作用（叶绿素含量、光合速率、暗反应、光呼吸）影响其他元素的吸收，如K+、Ca2+、Mg2+、Cl-等与植物的呼吸过程相关影响植物形态、产量等 Mg2+ 影响光合作用，叶绿素的组成成分、酶的活化剂与糖代谢、氮代谢相关影响核酸和蛋白质代谢参与脂肪代谢、促进维生素合成 Cd2+Pb2+Cu2+ 重金属 O2 参与植物呼吸过程光合作用产生氧气 H2O2 诱导植物产生系统获得抗性、高度敏感抗性和热抗性引起细胞衰老，诱导程序性死亡参与ABA调控的气孔关闭参与根的向地性、生长和不定根形成细胞壁发育的信号分子参与柱头和花粉粒的发育与相互作用参与信号转导调控基因表达 IAA 促进细胞伸长和细胞分化刺激形成层细胞分裂，抑制根细胞生长、促进木质部、韧皮部细胞分化、调节愈伤组织形态建成 ...
设备操作: LIX灌注长度
内容： LIX的长度随流速传感器种类不同而不同，一般除K+、Cl-和NO3-流速传感器外，LIX长度应在40-50μm，K+流速传感器180μm，Cl-和NO3-流速传感器80μm；灌充长度影响尖端的电阻，灌充过长的话电阻增大，流速传感器稳定较慢。而灌充过短的话容易造成LIX泄漏。离子选择性微流速传感器灌充液成分、离子交换剂型号、灌充长度一览表离子项目灌充液成分离子交换剂 LIX灌充长度 H+ 15 mM NaCl +40mM KH2PO4(pH 7.0) XY-SJ-H 40-50μm Ca2+ 100 mM CaCl2 XY-SJ-Ca 40-50μm K+ 100 mM KCl XY-SJ-K 180μm Na+ 250 mM NaCl XY-SJ-Na 40-50μm Cl- 100 mM KCl XY-SJ-Cl 80μm NH4+ 100 mM NH4Cl XY-SJ-NH4 40-50μm NO3- 10 mM KNO3 XY-SJ-NO3 80μm Cd2+ 10mM Cd(NO3)2+0.1mM KCl XY-SJ-Cd 40-50μm Mg2+ 500mM MgCl2 XY-SJ-Mg 40-50μm ...
设备操作: 校正时的注意事项
内容： 流速传感器不要碰底部，但最好深入液面较深处；参比电极和离子流速传感器的距离要保持相对固定，不要忽远忽近；在更换校正液之前冲洗参比电极。 H+需要将pH值换算成mM后再输入。以下是常用离子/分子不同浓度校正液相对应的电位值的参考值，不同系统下会有一定偏差，但如果没有特殊情况，电位值应该在这个范围之内。下表为校正液浓度为0.1mM时，各离子传感器电位的经验值。离子电位值 Na+ -90 mV— -50 mV K+ -100 mV— -70 mV NH4+ -80 mV— -40 mV Ca2+ -20 mV— +10 mV Mg2+ -20 mV— +10 mV Cd2+ +150 mV— +200 mV NO3- +280 mV— +350 mV Cl- +200 mV— +250 mV H+（pH6.0） +150 ...
设备操作: 配制校正液
内容： 配制校正液时，最好采用先配制好较高浓度的母液，然后稀释的方法配制，不要直接溶解固体，因为校正液中的离子浓度一般较低（大多数是0.01mM～1mM），直接用固体配的话称量的量会很少，导致误差增大，校正时不能达到理想值。每种离子的校正液要有一高一低两种浓度，原则上是要将测试液中该离子的浓度包含在内，一般高低浓度相差10倍，比如测试液中Na+是0.9mM，校正液就可以是0.5mM和5mM。H+的话原理一样，调节高低两种pH即可。校正液中除了待测离子外，还应该有测试液中同浓度的其他离子，pH最好也和测试液一致，如果要测定多种离子，可以配制成同一瓶校正液，但校正液中的待测离子浓度要相应改变。由于不同LIX的选择性不同，所以配制校正液时的离子浓度也是有要求的： H+：pH4-pH9之间。 Na+：10mM—0.5mM，而且溶液中K+浓度不要高于Na+。 K+：10mM—0.05mM，且溶液中Na+浓度不要高于K+。 Ca2+：10mM—0.05mM，且溶液中最好没有Cd2+或者浓度低10倍以上。 Mg2+：10mM—0.1mM，且溶液中最好没有Cd2+和Ca2+或者浓度低10倍以上。 Cd2+：1mM—0.005mM，别的离子基本没什么影响。 NH4+：10mM—0.05mM，电位可能不是很稳定，可以选用大开口流速传感器，如果测试中电位变化过大可以多校正或更换LIX。 NO3-：10mM—0.05mM，Cl-浓度不要太高。 Cl-：10mM—0.5mM，溶液中不能有其他阴离子，可能需要多次校正。调节校正液的pH需注意，不能用含有待测离子的酸或碱调节，如测定Na+时调节pH值不能用NaOH，否则就使溶液中的Na+含量增加，可用较少量的KOH调节，最好用氯化胆碱或Tris。 ...
实验设计: 预实验溶液尝试流程
内容： 一、所需溶液 1.标准溶液、校正液1、校正液2，按照NISC标准测试液配方配制。比如检测指标是Ca2+，标准溶液：0.1mM CaCl2，pH6.0 校正液1：0.5mM CaCl2，pH6.0 校正液2：0.05mM CaCl2，pH6.0 2.待尝试测试液、待尝试校正液1、待尝试校正液2，即需要尝试的溶液，比如检测Ca2+，测试环境中需要添加10mM glucose，则待尝试溶液配方为：待尝试测试液：0.1 mM CaCl2, 10 mM glucose, pH 6.0 待尝试校正液1：0.05 mM CaCl2, 10 mM glucose, pH 6.0 待尝试校正液2：0.5 mM CaCl2, 10 ...
文章撰写: 常见审稿问题
内容： 传感器选择效率：以Ca2+为例，如何确定Ca2+传感器检测到的为Ca2+信号，而非其它离子的信号？传感器对目标离子/分子的选择效率验证，是非损伤微测系统传感器商业化流程中的重要一步。研究人员会检测传感器对溶液中包括目标离子/分子在内的常见离子的选择效率，只有当传感器对目标离子/分子的选择效率达到95%以上时，才被认为符合科研需求。是否为真实信号——背景信号干扰程度流速信号的确有可能受到背景信号的干扰，从而产生非真实的信号。实验中，可采用传感器远离样品一定距离后所采集的信号，同样品信号进行对比，以确定检测结果是否受到背景信号的干扰。神经元Ca2+流速检测（F2011-005）如上图所示，在第150s时，将Ca2+传感器远离神经元200μm，此时测得的流速数据不受样品信号影响，即为背景值。如果背景值在0线上下小幅波动，表明背景信号弱，其对样品流速信号的影响有限，可认为此时的样品信号接近于真实信号。对于根、叶等样品，均可采用此法，以验证样品信号是否受背景信号的干扰。离子/分子流动方向、大小与以往文献不一致——N外排信号、IAA流速数量级 1. 为什么根部的NH4+、NO3-测不到吸收？ NMT作为活体检测技术，可反应样品的实时生理状态。而根部NH4+、NO3-的实时流动情况会受到诸多因素的影响，如前期培养、样品处理、取样方法、测试液成分、检测位点等等。NH4+、NO3-出现无法测到吸收并非异常情况，已发表的SCI文献中也多次报道（文献编号：C2013-008），可以根据课题需要对实验体系进行调整。不同基因型拟南芥根部成熟区的NO3-流速。正值为外排，负值为吸收下面分享几位老师对于此问题的经验及看法： 1）中国农业科学院水稻所某老师 a. 做NH4+、NO3-吸收动力学实验时（用测浓度技术），茶树苗一般会饥饿一周后进行检测。如果饥饿时间短，无法测到吸收也属正常情况。 b. NH4+较NO3-容易测到吸收，因为植物对NH4+浓度比较敏感，高NH4+浓度对植物有毒害作用，所以植物吸收NH4+后,会将其转化为其它物质，保持体内较低的NH4+浓度，而NO3-则无此机制，植物体内的NO3-浓度较NH4+高，不易测到吸收。 2）西北农林科技大学某老师 a. 样品使用幼苗，苗龄不宜太长，切忌为了多长一些根，以便扩大样品挑选空间而错过最佳检测时间； b. 扩大根部检测的范围，寻找吸收位点； c. 尽量避免长途运输，否则样品状态会受到较大影响。 3）海南大学某老师使用琼脂培养基培养的木薯，N饥饿一周，依然无法检测到NO3-吸收。虽然根毛稀少，但部分根毛可以检测到NO3-的吸收。 2. 为什么检测到的IAA流速值的数量级与国外文献中IAA的数量级差别较大？旭月公司研发的IAA传感器，是世界上第一款商业化IAA传感器。其检测数据已经在SCI期刊上发表了诸多成果（C2015-019，C2016-007），准确性已经得到了国际学术界的认可。因非损伤微测技术检测的是活体样品，受各类因素影响，信号变化幅度较大。不同的实验体系，检测结果相差较大，是较为普遍的现象。离体检测有影响——切根、撕叶片任何一个技术都无法做到绝对的“无损”，非损伤微测技术也不例外。为了符合非损伤微测技术的检测要求，有时需要采用切、剖等方式，将样品暴露出来。最常见的是将植物的根切下来后再进行检测。 1）诸多的研究成果已经侧面表明，对离体根进行检测，依然可以得到科学的结论。 2）有学者专门设计实验，对比离体前后，不同植物根部各个离子流速的差异。结果表明，将松树、豌豆、大豆等植物的地上部分切断，在之后的80分钟内，并没有导致其根部H+，NH4+，NO3-流速产生显著的变化（F2012-004）。在体花旗松根与离体花旗松根根部H+，NH4+，NO3-流速的对比样品检测时的测试液环境并非正常生长时的培养环境，这会对流速检测结果造成影响吗？样品检测时所处的溶液环境即测试液，其确定的原则是：既满足课题研究需求，又符合非损伤微测系统技术的要求。测试液成分的设计是开放性的，研究者可以根据自己的课题需求进行设计。在正式检测前，通过非损伤微测系统判断溶液成分是否会影响到传感器，从而导致流速结果的准确性受影响。假若符合技术要求，可直接使用此测试液上机检测；如果不符合技术要求，则需调整溶液的成分再判断是否符合技术要求。总之，测试液成分的确定过程，即是在科研需求与技术要求之间，寻找一个最佳的平衡点。作为研究者，对于“样品检测时的测试液环境并非正常生长时的培养环境，从而无法反映正常生理状态下的流速结果”这一问题，大可不必担心。从对现有的数百篇非损伤微测技术文献统计来看，测试液成分同培养液成分相同的情况，并不多见，但这依然不能阻止非损伤微测技术研究的发展。 ...
设备操作: 流速传感器（4～5um）和（8～10um）有和区别？
内容： 括号中的数字是传感器的开口大小。非损伤微传感器（4～5um）适用于测试组织样品的H+、Ca2+、K+、Na+、Mg2+、Cd2+、Cu2+和Pb2+的流速，非损伤微传感器（8～10um）适用于测试组织样品的NH4+、NO3-和Cl-离子的流速。 ...
文献电子报: Physiol Plantarum 耐盐旱文章
内容： 2012年8月9日，河北师范大学黄占景、肖艳红利用NMT在Physiologia Plantarum上发表了标题为A novel wheat α-amylase inhibitor gene, TaHPS, significantly improves the salt and drought tolerance of transgenic Arabidopsis的文章。期刊：Physiologia Plantarum 主题：一种新型小麦α-淀粉酶抑制剂基因TaHPS显着提高了转基因拟南芥的耐盐性和耐旱性标题：A novel wheat α-amylase inhibitor gene, TaHPS, ...
文献电子报: 联盟澳洲专家S Shabala：HKT1;5通过调节Na+/K+稳态传递Ca2+信号促植物耐盐
内容： 基本信息主题：HKT1;5通过调节Na+/K+稳态传递Ca2+信号促植物耐盐期刊：International Journal of Molecular Sciences 影响因子：4.556 标题：Changes in Expression Level of OsHKT1;5 Alters Activity of Membrane Transporters Involved in K+ and Ca2+ Acquisition and Homeostasis in Salinized Rice Roots 作者：Sergey Shabala（塔斯马尼亚大学、佛山科学技术学院）、Mohammad Alnayef（塔斯马尼亚大学）检测离子/分子指标 K+、Ca2+、Na+ 检测样品水稻及其近等基因系SKC1（NIL- SKC1）根伸长区（距根尖顶端1.2 mm根表上的点）、成熟区（距根尖顶端15 mm根表上的点）、木质部薄壁细胞中文摘要（谷歌机翻）有报道称OsHKT1;5基因是水稻耐盐的关键决定因素。该基因由SKC1基因座携带，其作用归因于木质部Na+的卸载。但是没有直接的证据能证明这个观点。此外，SKC1在向地上部分装载和运输K+方面还有待解释。本研究采用非损伤微测技术（MIFE）比较了野生型（WT）和NIL（SKC1）植物根木质部薄壁细胞Na+的吸收动力学。研究数据表明，在WT中观察到Na+的重吸收，而在NIL（SKC1）中没有该现象，从而研究质疑了HKT1;5作为转运体在木质部直接清除Na+中的功能作用。相反，HKT1;5表达水平的改变了水稻表皮和中柱中K+和Ca2+吸收及稳态相关的膜转运蛋白的活性，从而解释了观察到的表型。本研究的结论是，HKT1;5在植物耐盐性中的作用不能仅仅归因于降低木质部汁液中Na+的浓度，而是触发了在胁迫条件下参与维持植物离子稳态和信号传递的其他转运蛋白活性的复杂反馈调节。离子/分子流实验处理 80 ...
文献电子报: EEB中国农科院资源区划所：NMT发现外源SA促羊草种子吸O2提升排Na+保K+/Ca2+能力提高种子发芽率
内容： 基本信息主题：NMT发现外源SA促羊草种子吸O2提升排Na+保K+/Ca2+能力提高种子发芽率期刊：Environmental and Experimental Botany 影响因子：4.027 研究使用平台：NMT植物耐盐创新平台标题：Exogenous salicylic acid signal reveals an osmotic regulatory role in priming the seed germination of Leymus chinensis under salt-alkali stress 作者：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所程宪国、陈红娜检测离子/分子指标 Ca2+、K+、Na+、O2 检测样品羊草种子，种子胚顶部中文摘要（谷歌机翻）渗透调节剂在提高植物种子活力以应对非生物胁迫方面起着重要的调节作用。但种子萌发率较低一直是限制羊草繁殖的障碍因素，特别是在盐碱化的土壤中。本研究通过水杨酸浸种处理羊草种子，探讨外源水杨酸是否参与盐碱胁迫下羊草种子萌发的渗透调节。本文报道了水杨酸对促进羊草种子发芽率的诱导作用。数据表明，盐碱胁迫下，外源水杨酸促进了羊草萌发种子中O2的内流，从而提高了呼吸强度，引发了萌发种子的一系列生理变化。外源水杨酸通过调节Na+、K+、Ca2+等离子以及脯氨酸、可溶性糖等相容代谢产物的积累，平衡渗透势，降低质膜的渗透损伤。外源水杨酸处理增加了盐碱胁迫下羊草种子Na+的外排，抑制了K+和Ca2+的外排，从而降低了盐碱胁迫下羊草种子萌发过程中Na+的积累，使更多的K+和Ca2+保留下来，从而提高了羊草种子萌发过程中抗氧化酶的活性，减轻了损伤，促进了信号因子H2O2的积累，提高了羊草种子的发芽率。离子/分子流、离子浓度成像实验处理方法选取0.1 mM 水杨酸（SA）、蒸馏水（对照）处理，盐碱土培养3 d后的羊草种子测定Na+、K+、Ca2+流速，另外选取0.1 mM ...

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