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实验设计
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油菜叶绿体
内容:
实验1—预处理 目的:观察NaHCO3长时处理效应,以及外源钙对碱胁迫下离子平衡的影响。 检测样品:油菜 样品品种:碱敏感品种、耐碱品种 检测部位:叶绿体、叶肉细胞 处理方式: CK 75mM NaHCO3 75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2 75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂(根施:0.4mM,叶面喷施:0.04mM) 重复数:8 检测指标:Na+、Ca2+、K+ 具体方案 75mM NaHCO3、75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2、75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂处理3d/5d/10d/20d(时间点可调整,20d是原计划时间,电话里说了需要往前调整)后定点检测10 min。 参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/jgVHMzXIJp8mEvsuT6Ny3w https://mp.weixin.qq.com/s/hoDMtVPbC0jxqVZnvs7kRA 实验2—实时处理 目的:观察NaHCO3的短时处理效应,及外源钙对碱胁迫下离子平衡的影响。 检测样品:油菜 样品品种:碱敏感品种、耐碱品种 检测部位:叶绿体、叶肉细胞 处理方式: CK 75mM NaHCO3 75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2 75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂(根施:0.4mM,叶面喷施:0.04mM) 重复数:8 检测指标:Na+、Ca2+、K+ 具体方案 75mM NaHCO3处理12h/24h/3d(时间点可调整)后,CaCl2或Ca2+螯合剂实时处理。CaCl2或Ca2+螯合剂处理前检测3min,CaCl2或Ca2+螯合剂处理后检测10min。 CaCl2或Ca2+螯合剂处理6h/12h/24h/3d(时间点可调整)后,75mM NaHCO3实时处理。75mM NaHCO3处理前检测3min,75mM NaHCO3处理后检测10min。 NaHCO3+Ca2+螯合剂同时加入会产生沉淀,因此不采用同时处理的方法。 ...
实验设计
:
拟南芥根NaHCO3处理
内容:
实验1—Ca2+、H+、K+流速 检测样品:拟南芥 检测部位:根部伸长区—老师写的是成熟区(距离根冠1000 μm以上) 检测样品品种:WT、HA12#17、HA12#58、HA16#3、HA16#4、HA24#13、HA24#14 处理方式:无处理(对照)、7 mM 的NaHCO3处理24 h-48h(时间点不确定,暂定24和48h) 重复数:8 检测指标:Na+、H+、K+ 具体方案 对照组、7mM NaHCO3胁迫24h、48h后定点检测5 min 目的:观察NaHCO3长时处理效应,比较植物耐碱胁迫的能力 参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/jgVHMzXIJp8mEvsuT6Ny3w https://mp.weixin.qq.com/s/hoDMtVPbC0jxqVZnvs7kRA ...
实验设计
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番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容:
实验1—IAA、H2O2、H+、Ca2+流速 检测样品:番茄 检测部位:叶肉细胞 检测样品品种:AC 检测指标:IAA、H2O2、H+、Ca2+ 处理方式: 常温+光照(光照持续伴随样品) 常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 4℃低温瞬时+光照(光照持续伴随样品) 4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h+常温+光照(光照持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h+4℃低温瞬时+光照(光照持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 检测位点:叶肉细胞定点检测 测定时间: a、b、e、f组定点检测5min c、d、g、h组检测20min(先看前2-3个样品的数据稳定情况再进行时间调整) 重复数:8 测试液IAA、H2O2、H+、Ca2+:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH ...
实验设计
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番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容:
实验1—H+、Ca2+流速 检测样品:番茄 检测部位:叶肉细胞 检测样品品种:AC 检测指标:H+、Ca2+ 处理方式: 常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 检测位点:叶肉细胞定点检测 测定时间: a、c组定点检测5min b、d组检测15min (现场会根据前2个样品的实际信号变化情况,优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化,则延长实时处理后的检测时长;如不到15min信号已经处于稳定期,则缩短实时处理后的检测时长。) 重复数:8 测试液 H+、Ca2+:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0 实验3—Ca2+流速 检测样品:番茄 检测部位:叶肉细胞 检测样品品种:沉默A、沉默B、沉默C、沉默D、沉默E 检测指标:Ca2+ 处理方式: 常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h+常温+黑暗 27mM ...
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