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• 实验设计: 盐胁迫Na+吸收实验体系标准
  内容： 一、材料：拟南芥 二、基因型：WT、转基因1、转基因2 三、处理：200mM NaCl处理 四、检测指标：Na+ 五、检测部位：根分生区（过渡区中间）   六、具体方案： Na+吸收（测Na+） 【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】 一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。   1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.置于200mM NaCl中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组   （例如：200mM NaCl处理半小时，测试液50mM NaCl，0.1mM CaCl2，pH6.0，不需要平衡，放入测试液中直接开始测） ...
• 实验设计: 盐胁迫K+外排实验体系标准
  内容： 一、材料：拟南芥 二、基因型：WT、转基因1、转基因2 三、处理：200mM NaCl处理24h 四、检测指标：Na+，K+ 五、检测部位：根分生区（过渡区中间）   六、具体方案：   【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少         1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a. 200mM NaCl胁迫后，立即检测（200mM NaCl实时处理） b.置于200mM NaCl中处理24h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组（200mM NaCl预处理24h）   注意：测K+直接在胁迫浓度里测即可，例如测试液：200mM NaCl，0.1 mM KCl，0.1mM CaCl2，pH6.0 ...
• 实验设计: 盐胁迫Na+外排实验体系标准
  内容： 一、   材料：拟南芥 二、   基因型：WT、转基因1、转基因2 三、   处理：200mM NaCl处理24h 四、   检测指标：Na+ 五、   检测部位：根伸长区   六、   具体方案： 【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】   1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 置于200mM NaCl中处理24h后，记录10分钟，8重复/组     测试液：0.5mM NaCl，0.1mM CaCl2，pH6.0 ...
• 实验设计: 高铵胁迫NH4+外排实验体系标准
  内容： 一、   材料：拟南芥 二、   基因型：WT、转基因1、转基因2 三、   处理：10mM NH4Cl处理24h 四、   检测指标：NH4+ 五、   检测部位：根成熟区   六、   具体方案： 置于10mM NH4Cl中处理24h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组   测试液：0.1mM NH4Cl，0.1 mM CaCl2，pH6.0   铵外排检测时的样品平衡时间需要尝试，比如平衡20min检测一下、平衡40min检测一下，看看平衡多久能检测到持续稳定的铵外排。   ...
• 实验设计: 重金属胁迫测Cd实验体系标准
  内容： 一、   材料：2种茶树 二、   处理：1）0.01 mM CdCl2瞬时处理目的：Cd实时处理后，Cd2+吸收和H2O2的信号相对较强，有利益观察不用材料间的差异2）0.01 mM CdCl2处理12h、48h（时长可调整）目的：观察Cd长时处理效应3）0.1 mM CdCl2瞬时处理（浓度可调整）4）0.1 mM CdCl2处理12h、48h（时长可调整） 三、   检测指标：Cd2+   四、   检测位点：根 （根部Cd定点位置统计：分生区52.94%、伸长区41.18%、成熟区23.53%、根冠11.76%；根部Cd定点优先位置：伸长区）   五、   具体实验细节：1、Cd2+1）瞬时处理后建议检测时长为30分钟，根据前2个样品的实际信号变化情况，可现场优化检测时长。2）12h、48h处理后，检测10分钟稳定数据即可   六、   参考文献https://mp.weixin.qq.com/s/ghdDSYJqyha59A5_BYFCJg ...
• 实验设计: 植物营养NH4+、NO3-实验体系标准
  内容： 一、   材料：水稻 二、   基因型/品种：1个对照、1个过表达株系、1个RNAi株系 三、   检测指标：NH4+、NO3- 四、   检测位点：根 五、   重复：8 六、   处理 正常NH4NO3处理3d 低NH4NO3处理3d 高NH4NO3处理3d   【具体方案】 扫点实验：对照样品选取4个重复进行扫点实验，具体检测位点 300μm、800μm、1500μm、2500μm、7500μm，15000μm每个点检测3min   定点实验：根据扫点实验结果，选择NH4+、NO3-吸收最大的点进行定点实验，每个点检测5min   测试费用报价： 扫点： 1（基因型）×1（处理）×1（指标）×6（位点）×4（重复）×132元/样（定点3min）   定点： 3（基因型）×2（指标）×3（实验组）×8（重复）×195元/样（定点：5min）     ...
• 实验设计: 植物免疫Ca2+流（测叶肉细胞）实验体系标准
  内容： 一、材料：水稻 二、基因型/品种：WT、mutant、OE 三、检测部位：叶肉细胞 四、检测指标：Ca2+ 五、处理： 1. 无处理 2. 10 mg/mL chitin处理 24h 3. 病原菌处理24h 4. 10 mg/mL chitin瞬时处理 5. 病原菌瞬时处理   六、具体方案： 处理1、2、3：无处理、10 mg/mL chitin处理24h、病原菌处理24h后，定点检测叶肉细胞10min，8重复/组   处理4、5：10 mg/mL chitin、病原菌处理前检测5min，10 mg/mL chitin、病原菌处理后，检测10分钟（如信号在瞬时处理后10分钟内没有稳定，会延长测试时间），8重复/组   参考文献 保卫细胞：https://mp.weixin.qq.com/s/YovUAnqOYkIViXUHe0dFWw 叶肉细胞：https://mp.weixin.qq.com/s/0UZ_cqxDL_zBxQZz4ok7Pg   测试费用报价： 3（基因型）*1（测试指标）*1（测试部位：根）*1（处理方式：chitin瞬时）*8（重复数）*470 一、材料：水稻 二、基因型/品种：WT、mutant、OE 三、检测部位：叶肉细胞 四、检测指标：Ca2+ 五、处理： 1. 无处理 2. 10 mg/mL chitin处理 24h 3. 病原菌处理24h 4. 10 mg/mL chitin瞬时处理 5. 病原菌瞬时处理   六、具体方案： 处理1、2、3：无处理、10 mg/mL chitin处理24h、病原菌处理24h后，定点检测叶肉细胞10min，8重复/组   处理4、5：10 mg/mL chitin、病原菌处理前检测5min，10 mg/mL chitin、病原菌处理后，检测10分钟（如信号在瞬时处理后10分钟内没有稳定，会延长测试时间），8重复/组   参考文献 保卫细胞：https://mp.weixin.qq.com/s/YovUAnqOYkIViXUHe0dFWw 叶肉细胞：https://mp.weixin.qq.com/s/0UZ_cqxDL_zBxQZz4ok7Pg     ...
• 实验设计: 植物低温Ca2+流实验体系标准
  内容： 一、材料：水稻 二、基因型/品种：WT、mutant、OE 三、检测部位：叶肉细胞 四、检测指标：Ca2+ 五、处理： 4℃瞬时处理   六、具体方案： 4℃处理前检测5min，4℃处理后，检测10分钟（，8重复/组   ...
• 实验设计: 干旱实验体系标准
  内容： 一、 材料：拟南芥 二、 基因型：WT、OE 二、检测部位：保卫细胞 三、检测指标：Ca2+、K+、H+ 四、处理： 1. 对照 2. 自然干旱胁迫10天   五、具体方案 定点检测5分钟，8重复/组   测试液：2.0mM KCl+0.1mM CaCl2+5.0mM MES，pH6.0（可测K、Ca、H、Cl） 平衡时间：如果检测气孔打开的，照光（10000~20000lux）平衡1h ...
• 实验设计: 植物免疫Ca2+流（测根）实验体系标准
  内容： 一、材料：拟南芥 二、品种：WT、mutant 三、检测部位：根内皮层细胞 四、检测指标：Ca2+ 五、处理 1 μM Flg22瞬时处理   六、具体方案： 1 μM Flg22瞬时处理前检测5分钟，1 μM Flg22瞬时处理后检测10min，8重复/组   测试液：0.1mM CaCl2, pH 6.0 平衡时间：4 h ...
• 实验设计: Fe营养NMT实验设计手册
  内容： 一、材料：大白菜二、基因型/品种：转基因、WT三、检测部位：根分生区（H+）、根成熟区（Cd2+）四、检测指标：H+、Cd2+五、处理：1)  CK 2)  200mM NaCl处理 2d六、具体方案：1. H+、Cd2+200mM NaCl处理2d后，定点检测10分钟，8重复/组【参考视频】1.如何利用非损伤微测系统（NMT）进行Fe2+营养研究？（检测Cd2+的原因）https://tv.sohu.com/v/dXMvMjQ0NTI0MjEyLzk2MDUxMzEwLnNodG1s.html有研究发现Fe2+、Zn2+的转运用的都是同一个转运蛋白，该蛋白同时还能转运Cd2+，因为无法直接测Fe2+，那么检测Cd2+流速，如果是吸收的，间接证明了Fe2+也是吸收的，再结合ICP-MS等类似实验，检测植物体内的离子含量，也可以验证Fe2+的吸收。2.如何通过检测H+流研究植物Fe营养？（检测H+的原因）https://v.qq.com/x/page/p0521l0uc4t.html缺铁的情况下，植物为了吸收更多的铁（土壤里的铁都是三价的），会诱导一些ATP酶，把ATP酶放在质膜上诱导生成更多的H+，然后根系泌H+，土壤酸化，三价铁再高铁还原酶的作用下被还原成二价铁，再被吸收。【参考文献】C2014-013标题：Over-expression of the MxIRT1 gene increases iron and zinc content in rice seeds ...
• 非损伤微测技术(NMT)介绍: 什么是非损伤微测技术？
  内容： 非损伤微测技术（Non-invasive Micro-test Technology：NMT）是一种超高灵敏度，非接触、流速为单位，检测材料外部离子分子浓度及其梯度的技术。 ...
• 非损伤微测技术(NMT)介绍: 非损伤微测技术的材料科学应用
  内容： 离子分子不仅是构成材料的基本元素，同时也是它们与外界环境进行物质及信息交换的重要载体。这种交换过程会在材料表面形成离子分子浓度梯度，非损伤微测技术就是通过检测这些离子分子浓度梯度，揭示金属材料的腐蚀机制，以及生物材料的生物兼容性机理。 ...
• 非损伤微测技术(NMT)介绍: 非损伤微测技术的民生应用
  内容： 随着NMT技术在生命科学和材料科学中的应用持续深入，各种离子分子所参与的功能和机制不断被阐明，相关的民生应用开始加速涌现。比如：医疗精准用药、空气/水微生物（含新冠病毒）污染检测、高通量种子活力生理检测、老年痴呆快速评估、生殖组织细胞活性快速检测、个性化农作物经济施肥评估等等。 ...
• 非损伤微测技术(NMT)介绍: 非损伤微测技术的生命科学应用
  内容： 离子和分子稳态是所有生命的共同基本特征之一，且是一种动态平衡。它不断微调以响应细胞器、细胞、组织、器官和整个生物体的内部和外部环境变化。 该动态平衡是通过维持各类生物膜两侧的离子和分子浓度梯度来实现的。非损伤微测技术则通过检测这些跨膜运动离子分子形成的浓度梯度，揭示活体材料的离子分子稳态这一生命基本特征，及其相关的生理功能与机制。 ...
• 非损伤微测技术(NMT)介绍: 非损伤微测技术的起源
  内容： 非损伤微测技术的诞生及其命名，是许越教授与匡廷云院士、杨福愉院士、林克椿教授等科学家一道，在美国科学家Lionel Jaffe的钙离子振荡电极技术（Vibrating Probe：VP，1974）原理基础上，以2005年创立的旭月（北京）科技有限公司为技术支持和商业后盾，经过分子离子种类扩增，测量精度的大幅提升，测量方式的模块化、⾃动化、专业化、智能化、标准化改进，以及3D立体数据采集及动画演示等新功能的成功研发而成。目前，非损伤微测技术已成为世界上同类型VP技术商业化产品，比如澳洲：MIFE，美国：SIET、SERIS等品牌中的一员，并于2021年通过科技部世界领先评审。 ...
• 实验设计: 柚木根有无接菌处理
  内容： 【方案一：预处理（长时处理）】 材料：柚木（不接种真菌、接种真菌1、接种真菌2） 处理：干旱胁迫（自然干旱） 检测指标：Ca2+、H2O2 检测位点：根 重复：8 具体实验内容 自然干旱10d（时间点可调整）后，定点检测柚木根部5min 【方案二：实时处理】 材料：柚木（不接种真菌、接种真菌1、接种真菌2） 处理：干旱胁迫（20%PEG模拟干旱胁迫，浓度可调整） 检测指标：Ca2+、H2O2 检测位点：根 重复：8 具体实验内容 10%PEG处理前检测5min，10%PEG处理后检测10min 实验目的：干旱胁迫条件下，研究接种丛枝菌根真菌能否促进植物根系过氧化氢的外排以减轻植物的氧化胁迫 ...
• 实验设计: 油菜叶绿体
  内容： 实验1—预处理 目的：观察NaHCO3长时处理效应，以及外源钙对碱胁迫下离子平衡的影响。 检测样品：油菜 样品品种：碱敏感品种、耐碱品种 检测部位：叶绿体、叶肉细胞 处理方式： CK 75mM NaHCO3 75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2 75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂（根施：0.4mM，叶面喷施：0.04mM） 重复数：8 检测指标：Na+、Ca2+、K+ 具体方案 75mM NaHCO3、75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2、75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂处理3d/5d/10d/20d（时间点可调整，20d是原计划时间，电话里说了需要往前调整）后定点检测10 min。 参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/jgVHMzXIJp8mEvsuT6Ny3w https://mp.weixin.qq.com/s/hoDMtVPbC0jxqVZnvs7kRA 实验2—实时处理 目的：观察NaHCO3的短时处理效应，及外源钙对碱胁迫下离子平衡的影响。 检测样品：油菜 样品品种：碱敏感品种、耐碱品种 检测部位：叶绿体、叶肉细胞 处理方式： CK 75mM NaHCO3 75mM NaHCO3+ 1mM CaCl2 75mM NaHCO3+Ca2+螯合剂（根施：0.4mM，叶面喷施：0.04mM） 重复数：8 检测指标：Na+、Ca2+、K+ 具体方案 75mM NaHCO3处理12h/24h/3d（时间点可调整）后，CaCl2或Ca2+螯合剂实时处理。CaCl2或Ca2+螯合剂处理前检测3min，CaCl2或Ca2+螯合剂处理后检测10min。 CaCl2或Ca2+螯合剂处理6h/12h/24h/3d（时间点可调整）后，75mM NaHCO3实时处理。75mM NaHCO3处理前检测3min，75mM NaHCO3处理后检测10min。 NaHCO3+Ca2+螯合剂同时加入会产生沉淀，因此不采用同时处理的方法。 ...
• 实验设计: 油菜盐胁迫
  内容： 材料：油菜 品种：耐盐、不耐盐 处理： 对照 150mM Na盐处理 150mM Cl盐处理 检测指标：Na+，K+、Cl- 检测部位：根木质部中柱 具体方案： 瞬时实验： 150mM Na盐/Cl盐处理30min后（时间可以调整，但不宜过长），检测10min 预处理实验：150mM Na盐/Cl盐处理12h、72h后，检测10分钟稳定数据（该处理方式下检测木质部需要尝试） 七：重复数：8 ...
• 实验设计: 叶肉细胞白粉菌
  内容： 材料：感病、抗病 处理：接种白粉菌1d、3d、5d（时间为假设时间，可根据实际情况进行调整） 检测指标：Ca2+ 检测位点：叶肉细胞（感病部位） 重复：8 具体实验内容 对接种白粉菌1d、3d、5d后感病、抗病品种的叶肉细胞进行定点检测10min ...

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