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实验设计
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苹果根缺铁处理H
内容:
材料:苹果 基因型:EV、iqm 检测部位:根成熟区 检测指标:H+ 处理:缺铁处理 具体方案: 定点检测5 min,3重复/组 ...
实验设计
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苹果根FeEDTANa处理H2O2
内容:
材料:苹果 检测部位:根分生区 检测指标:H2O2 处理: 40μM FeEDTANa处理0h 3h 6h 9h 12h 1d 3d 6d 9d 0μM FeEDTANa处理0h 3h 6h 9h 12h 1d 3d 6d 9d 具体方案: 0/40μM FeEDTANa处理0h 3h 6h 9h 12h 1d ...
实验设计
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苹果根Cu,CuSO4处理
内容:
【方案一】 材料:苹果 处理: 0.4 mM N处理培养和0.125μM CuSO4.5H2O 0.4 mM N处理培养和15μM CuSO4.5H2O处理培养 4 mM N处理培养和0.125μM CuSO4.5H2O处理培养 4 mM N处理培养和15μM CuSO4.5H2O处理培养 16 mM N处理培养和0.125μM CuSO4.5H2O处理培养 16 mM N处理培养和15μM CuSO4.5H2O处理培养 检测指标:Cu2+ 重复:8 检测位点:距根尖400μm 实验方案: 处理20d后的样品,定点检测5分钟稳定数据 【方案二】 材料:苹果 处理: 0.4 mM N处理培养和0.125μM CuSO4.5H2O 0.4 mM N处理培养和15μM CuSO4.5H2O处理培养 4 ...
实验设计
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拟南芥根 叶酸+硝酸钾处理 NO3-
内容:
方案一 材料:拟南芥 品种:WT、atdfb-3 处理: 9.4mM KNO3处理1d、3d、6d 9.4mM KNO3 +叶酸处理1d、3d、6d(仅处理atdfb-3突变体) 检测指标:NO3- 检测部位:根成熟区 具体方案: 处理1d、3d、6d后,检测10分钟稳定数据 七、重复数:6 方案二 材料:拟南芥 品种:WT、atdfb-3 处理: 9.4mM KNO3处理6d 9.4mM KNO3 +叶酸实时处理(仅处理atdfb-3突变体) 检测指标:NO3- 检测部位:根成熟区 具体方案: 9.4mM KNO3处理6d后,检测10分钟稳定数据,8重复/组 9.4mM KNO3 +叶酸实时处理前检测5分钟,9.4mM KNO3 +叶酸实时处理后持续检测20分钟(摸索最佳处理时间),4重复/组 测试液 9.4mM KNO3,0.1mM CaCl2,pH6.0 叶酸,9.4mM KNO3,0.1mM CaCl2,pH6.0 2021.9.9 材料:拟南芥 品种:WT、atdfb-3 处理: 9.4mM KNO3处理6d 9.4mM KNO3+50μM叶酸处理6d 检测指标:NO3- 检测部位:根成熟区 具体方案: 处理6d后,检测10分钟稳定数据 七、重复数:6 ...
实验设计
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拟南芥根盐胁迫
内容:
材料:拟南芥 基因型:转基因1、转基因2、转基因3、转基因4、突变体1 重复数:6 二、处理: NaCl处理24h 三、检测指标:Na+ 四、检测位点:根分生区(过渡区) 五、具体实验细节: NaCl处理24h后,定点检测5分钟稳定数据 【目的:查看盐胁迫下,不同植物根部排Na+能力差异】 ...
实验设计
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拟南芥根盐胁迫
内容:
周四早上: 先进行周五早上盐胁迫苗子的处理(需要NaCl胁迫24小时) 周五: 上午对前一天NaCl处理的苗子进行测试 实验1、基因A对盐胁迫介导的跨膜离子流动的影响,共12个样品 检测样品:拟南芥 检测部位:根 检测样品品种:A和B(*2) 检测指标:Na+外排 处理方式:正常培养5~6天后,100mM NaCl处理24h后,放入测试液。 检测位点:扫点:根毛区、分生区、伸长区(*3),优先测根毛区。 测定时间:对照组:检测3分钟(三个区域测同一棵苗,进行扫点)盐胁迫组:测5分钟(三个区域测同一棵苗,进行扫点) 重复数:3(*3) 处理液:NaCl(100mM),pH5.8测试液:NaCl(0.5mM),pH5.8 实验2、基因A对冷胁迫介导的跨膜离子流动的影响,共12个样品 检测样品:拟南芥 检测部位:根 检测样品品种:A和B(*2) 检测指标:Ca2+ 处理方式:正常培养后冷胁迫瞬时处理 检测位点:分生区、伸长区(*2),优先测分生区。 测定时间:处理前:检测3分钟4℃处理瞬时处理后:检测10分钟(处理前处理后测同一棵苗) 重复数:3(*3) 测试液:0.5 mM CaCl2,pH5.8低温测试液:0.5 mM CaCl2,pH5.8 ...
实验设计
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拟南芥根Na、K盐胁迫
内容:
材料:拟南芥 基因型:WT、转基因1、转基因2 处理:200mM NaCl处理24h 检测指标:Na+,K+ 检测部位:根分生区(过渡区中间) 具体方案: Na+吸收(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,谁的Na+进入的少】一般来说,耐盐材料在盐胁迫下,吸Na+速率更小。1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)盐胁迫组a.置于200mM NaCl中处理0.5/1/2 h后,直接检测,记录10分钟,8重复/组 Na+外排(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制,是不是根部排Na+能力更强1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)盐胁迫组置于200mM NaCl中处理24h后,记录10分钟,8重复/组 K+吸收/外排(测K+) 【目的:查看盐胁迫下,植物保K+能力,也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说,耐盐材料,盐胁迫下排K+更少 1)对照组 置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组 2)盐胁迫组 200mM NaCl胁迫后,立即检测(200mM NaCl实时处理) b.置于200mM NaCl中处理24h后,直接检测,记录10分钟,8重复/组(200mM NaCl预处理24h) ...
实验设计
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拟南芥根Ca TM和DMSO预处理 瞬时实验
内容:
【实验一:实时处理】 材料:6日龄拟南芥 基因型:WT、突变体 三、检测指标:Ca2+ 四、检测位点:根分生区(过渡区) 五、重复:8 【具体方案】 对照组:5 mg/L DMSO 处理前检测5min,5 mg/L DMSO实时处理后检测10 min 处理组:5 mg/L TM处理前检测5min,5 mg/L TM实时处理后检测10 min 备注:对照组、处理组能否只检测一组药品处理前的样品 【实验二:预处理】 材料:6日龄拟南芥 基因型:WT、突变体 三、检测指标:Ca2+ 四、检测位点:根分生区(过渡区) 五、重复:8 【具体方案】 TM处理0h(对照)、3h、6h后定点检测5min ...
实验设计
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拟南芥保卫细胞K、Cl免疫
内容:
检测样品:拟南芥 检测部位:保卫细胞 检测样品品种:WT 检测指标: K+、Cl- 处理方式: flg22(100 nM)实时处理 ABA(10 uM)实时处理 flg22+SCREW实时处理 ABA+SCREW实时处理 检测位点:保卫细胞定点检测 测定时间:a、b、c、d组加药前检测3min,加药后检测10min(根据前两个样品数据的稳定情况决定后续样品的检测时间) 重复数:6 ...
实验设计
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拟南芥保卫细胞ACC瞬时处理
内容:
材料:拟南芥 基因型:野生型、突变体、过表达 处理:50μM ACC处理10min 检测指标:H2O2 检测位点:保卫细胞 重复:3 具体实验内容 50μM ACC处理前检测10min,50μM ACC处理10min后再检测10min ...
实验设计
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棉花纤维胚珠H
内容:
检测样品:棉花 基因型:WT、转基因1、转基因2 检测部位:棉花纤维顶端、侧边 处理:1DPA、3DPA 检测指标:H+ 具体实施方案: 所有材料选择同一位置的胚珠上相同区域的纤维细胞进行检测,检测10分钟,8重复/组 ========= 测试液:0.1mM CaCl2,pH6.0 ...
实验设计
:
梨果皮CaCl2处理
内容:
【方案一】 材料:梨果实 检测部位:果皮(在注射孔周围取样,检测靠近果肉的那一侧) 检测指标:Ca2+(流速)、H2O2(流速) 处理: 注射空载 转基因1 转基因1+2%CaCl2浸泡5s 转基因2 转基因2+2%CaCl2浸泡5s 2%CaCl2实时处理 具体方案: 1、2、3、4、5组处理定点检测10分钟,8重复/组 6组处理2%CaCl2实时处理后持续监测15分钟,8重复/组 测试液:0.01mM CaCl2,pH6.0 【方案二】 材料:梨果实 检测部位:果皮(在注射孔周围取样,检测靠近果肉的那一侧) 检测指标:Ca2+(检测果实内部质外体浓度)、H2O2(浓度) 处理: 注射空载 转基因1 转基因1+2%CaCl2浸泡5s 转基因2 转基因2+2%CaCl2浸泡5s 具体方案: 定点检测,8重复/组 测试液:0.01mM CaCl2,pH6.0 ...
实验设计
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黄瓜根低温、Ca瞬时
内容:
检测样品:黄瓜 基因型:WT、转基因1、转基因2、转基因3 检测部位:根分生区 处理:4℃低温实时处理 检测指标:Ca2+ 具体实施方案: 4℃低温处理前(常温)检测10分钟,4℃低温处理后(低温)检测10分钟,8重复/组 ...
实验设计
:
蕃茄根干旱
内容:
【方案一:实时处理】 材料:番茄 处理:干旱胁迫(10%PEG8000)、几丁质胁迫(浓度未定) 检测指标:Ca2+、H2O2、IAA 检测位点:干旱胁迫(根、叶肉细胞、保卫细胞)、几丁质胁迫(叶肉细胞、保卫细胞) 重复:8 具体实验内容 10%PEG处理前检测3min,10%PEG处理后检测10min 几丁质处理前检测3min,几丁质处理后检测10min 【方案二:预处理(长时处理)】 材料:番茄 处理:干旱胁迫(10%PEG8000)、几丁质胁迫(浓度未定) 检测指标:H2O2、IAA 检测位点:干旱胁迫(根、叶肉细胞、保卫细胞)、几丁质胁迫(叶肉细胞、保卫细胞) 重复:8 具体实验内容 10%PEG、几丁质处理4h/6h/12h/24h(时间不宜过长)后,定点检测5min ...
实验设计
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番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容:
实验1—IAA、H2O2、H+、Ca2+流速 检测样品:番茄 检测部位:叶肉细胞 检测样品品种:AC 检测指标:IAA、H2O2、H+、Ca2+ 处理方式: 常温+光照(光照持续伴随样品) 常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 4℃低温瞬时+光照(光照持续伴随样品) 4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h+常温+光照(光照持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h+4℃低温瞬时+光照(光照持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 检测位点:叶肉细胞定点检测 测定时间: a、b、e、f组定点检测5min c、d、g、h组检测20min(先看前2-3个样品的数据稳定情况再进行时间调整) 重复数:8 测试液IAA、H2O2、H+、Ca2+:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH ...
实验设计
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番茄Cd扫点/定点/瞬时/预处理
内容:
【方案一:扫点+瞬时】 材料:番茄 检测指标:Cd2+ 处理: 不接种AM真菌 接种AM真菌 检测位点:扫点+定点 五、具体实验细节: 选择不接种AM真菌的番茄幼苗在100μM CdCl2中处理1h(处理时间可调整,仅针对扫点实验设计),在分生区(800μm)、伸长区(2500μm)、成熟区(7500μm)各选择一个点进行扫点检测3min,3重复/组 2.根据扫点结果确定定点检测的位置,进行瞬时实验。100μM CdCl2处理前检测5分钟,100μM CdCl2处理后检测10分钟,6重复/组 【方案二:瞬时】 材料:番茄 检测指标:Cd2+ 处理: 不接种AM真菌 接种AM真菌 检测位点:根伸长区 五、具体实验细节: 100μM CdCl2处理前检测5分钟,100μM CdCl2处理后检测10分钟,6重复/组 【方案三:扫点+预处理30天】 材料:番茄 处理: 不接种AM真菌+100μM CdCl2处理30d 接种AM真菌+100μM CdCl2处理30d 检测指标:Cd2+ 检测位点:扫点+定点 五、具体实验细节: 选择”不接种AM真菌+100μM CdCl2”的番茄幼苗,在分生区(800μm)、伸长区(2500μm)、成熟区(7500μm)各选择一个点进行扫点检测3min,3重复/组 根据扫点结果确定定点检测的位置,处理1、2定点检测10分钟,6重复/组 【方案四:预处理30天】 材料:番茄 处理: 不接种AM真菌+100μM CdCl2处理30d 接种AM真菌+100μM CdCl2处理30d 检测指标:Cd2+ 检测位点:根伸长区 五、具体实验细节: 处理1、2定点检测10分钟,6重复/组 ...
实验设计
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沉水植物龙舌草叶片表面碳酸根处理
内容:
材料:沉水植物龙舌草 处理: 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.05mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.3mM DIDS+0.05mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.2mM DES+0.05mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.3mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.3mM DIDS+0.3mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.2mM DES+0.3mM KCl 三、检测指标:H+、Cl- 四、检测位点:叶片表面(正面和反面。非叶肉细胞,不用撕开。) 五、重复:8 六、具体方案 在①-⑥处理30分钟后,在载物台上静置7分钟,定点检测叶片正、反面各5min 七、测试液 H+(提前配置,静置4h以上使用): 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.05mM ...
实验设计
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不结球白菜硒+药处理
内容:
检测样品:1种不结球白菜 检测部位:根分生区 检测指标:Ca2+ 处理方式: 空白对照 20μM硒胁迫 20μM硒胁迫+50μM药缓解 5. 具体实施方案: 无任何处理组,检测10min数据 硒+药同时处理24h(时长可调整)后,检测10min数据 6. 重复数:8 ...
实验设计
:
昆虫触角
内容:
检测样品:昆虫 检测部位:触角 检测指标:K+ 检测位点及测定时间:扫点测量,每个位点测定稳定数据时间3min 测试液:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mMNa2SO4, pH 6.0 ...
实验设计
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番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容:
实验1—H+、Ca2+流速 检测样品:番茄 检测部位:叶肉细胞 检测样品品种:AC 检测指标:H+、Ca2+ 处理方式: 常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 检测位点:叶肉细胞定点检测 测定时间: a、c组定点检测5min b、d组检测15min (现场会根据前2个样品的实际信号变化情况,优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化,则延长实时处理后的检测时长;如不到15min信号已经处于稳定期,则缩短实时处理后的检测时长。) 重复数:8 测试液 H+、Ca2+:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0 实验3—Ca2+流速 检测样品:番茄 检测部位:叶肉细胞 检测样品品种:沉默A、沉默B、沉默C、沉默D、沉默E 检测指标:Ca2+ 处理方式: 常温+黑暗(黑暗持续伴随样品) 4℃低温瞬时+黑暗(黑暗持续伴随样品) 27mM CaCl2处理2h+常温+黑暗 27mM ...
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