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设备操作: 离子传感器校正时，如果电压读数出现错误或显示超量程怎么办？
内容： （1）检查参比电极内部保存溶液是否充足？如果不足，补充3M KCl溶液。（2）参比电极是否浸没在溶液中？如果不在溶液中，将参比电极放入校正液中。（3）传感器是否浸没在溶液中？如果不在溶液中，将传感器放入校正液中。（4）上述步骤无效，取下传感器在传感器制备显微镜下观察尖端是否有气泡，如果有重新制作传感器。 ...
设备操作: 我们的实验室要搬家，能否提供移机服务？
内容： 我们的实验室要搬家，能否提供移机服务？ ...
实验设计: 玫瑰根盐胁迫
内容： 一、材料：玫瑰二、处理：对照、3%NaCl、5%NaCl 三、检测指标：Na+，K+ 四、检测部位：根分生区五、具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的根部Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，根部吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录5分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物根部排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），移至测试液中放置20分钟后检测，记录5分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+）【目的：查看盐胁迫下，植物根保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】一般来说，耐盐材料，盐胁迫下根部排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测 b.置于盐溶液中处理6、12、24、48h后（时间点可以调整），直接检测，记录5分钟，8重复/组 ...
实验设计: 马铃薯根预处理
内容： 检测样品：马铃薯基因型：高积累、低积累检测部位：根伸长区、茎维管束处理：50μM CdCl2处理6h、48h 检测指标：Ca2+、Cd2+、H+ 具体实施方案： 50μM CdCl2处理6h、48h后，定点检测10分钟，8重复/组 ...
实验设计: 蓝藻NO3-化感物质黄铜处理
内容： 材料：蓝藻检测指标：NO3- 检测位点：蓝藻细胞定点检测实验目的：蓝藻在化感物质（黄酮）的胁迫下，硝酸盐的吸收是否受到影响具体方案 1）实时处理目的：黄酮实时处理后，NO3-的信号变化相对较强，有利益观察不用处理间的差异 0.1mM黄酮实时处理方案：瞬时处理前检测3min，瞬时处理后检测10分钟，现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到15min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。 2）预处理目的：观察NO3-长时处理效应对照，0.1mM黄酮、0.5mM黄酮处理24h 对照，0.1mM黄酮处理6h、24h 方案：处理后检测3min（a、b处理方式均适用）。六、参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/VSGIRPkre9xckMPdidEwjg ...
实验设计: 花花柴根Na、K盐胁迫
内容： 【方案一：NaCl浓度递增处理】材料：花花柴处理：0、100、200、300、400mM NaCl以递增的方式添加，直到添加到400mM NaCl后，再处理24h。检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区具体方案： Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理24h后，记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+）【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测（即100、200、300、400mM NaCl瞬时处理，处理前检测5min，NaCl处理后检测10min） b.置于盐溶液中处理24h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组【方案二：NaCl直接处理，可能植物有应激反应，但是不会影响离子流速的变化】材料：花花柴处理：0、100、200、300、400mM NaCl处理6/12/24/48h后（时间点可以调整）检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录0分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+）【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测（即100、200、300、400mM NaCl瞬时处理，处理前检测5min，NaCl处理后检测10min） b.置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），直接检测，记录10分钟，8重复/组 ...
实验设计: 枸杞、番茄根叶肉Na、K盐胁迫
内容： 材料：枸杞、番茄基因型：WT、转基因处理：100mM NaCl（浓度可调整）检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区、叶肉细胞具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录5分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），记录5分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+）【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测 b.置于盐溶液中处理6、12、24、48h后（时间点可以调整），直接检测，记录5分钟，8重复/组 ...
实验设计: 根、中柱、茎 Cd
内容： 一、材料：WT、OE、RNAi 二、处理： 1）20 μmM CdCl2瞬时处理（可测根成熟区、根中柱、茎木质部）目的：Cd实时处理后，Cd2+吸收和H2O2的信号相对较强，有利益观察不用材料间的差异 2）20 μmM CdCl2处理5d（可测根成熟区）目的：观察Cd长时处理效应三、检测指标：Cd2+ 四、检测位点：根成熟区、根中柱、茎木质部五、具体实验细节： 1、Cd2+ 1）瞬时实验：20 μmM CdCl2处理前检测5min，20 μmM CdCl2实时处理后处理后检测10min 2）预处理实验：20 μmM CdCl2处理5d后，检测10分钟稳定数据即可六、重复数：8 七、参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/ghdDSYJqyha59A5_BYFCJg ...
实验设计: 柑橘砧木、枳根 Al+B
内容： 一、材料：柑橘砧木、枳二、检测指标：H+ 三、检测位点：根成熟区四、重复：8 五、处理 1）低B（10μM硼，0μM铝） 2）低B+Al（10μM硼，300μM铝） 3）高B（50μM硼，0μM铝） 4）高B+Al（50μM硼，300μM铝）六、具体方案实验1：检测排H+速率（Al预处理3h）目的：观察硼缓解铝毒的长时处理效应 a）低B/高B处理2d（时长可调整），检测5min数据 b）低B/高B处理2d（时长可调整），加入Al处理3h（时长可调整）后，检测5min数据 c）备注：上述方案是B预处理后Al处理（参考PP文章），如有需要，也可以选择B和Al同时处理的方式。实验2：检测根表H+浓度/pH值（Al预处理3h）目的：观察B处理后，Al胁迫下根表pH值的变化（NMT可以测根表pH）具体方案：与实验1一致实验3：检测Al实时处理后的排H+速率目的：根据经验，Al实时处理后，H+的信号变化相对较强，有利于观察不用处理间的差异 a）低B/高B处理2d（时长可调整），检测5min数据（如果做了实验1，这个可以不做），实时加入300μM铝试剂，立即持续检测10min数据。 b）实时加入铝试剂后的检测时长，暂定10min，现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如10min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到10min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。七、参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/Rfl3Cmhf4HmhI7WNA-v6Mg ...
实验设计: 斑马鱼胚胎酸碱处理
内容： 一、材料：斑马鱼二、检测指标：H+ 三、检测位点：斑马鱼胚胎四、处理： a.对照（pH7.0） b.酸处理（pH5.0）3-4天 c.碱处理（pH8.0/9.0）3-4天五、具体实验细节：处理3-4天，出现卵黄囊时开始检测，定点检测10min。六、重复数：8 测试液：对照：0.5mM NaCl，0.16mM KH2PO4，0.16mM K2HPO4，0.2mM MgSO4，0.2mM CaSO4，pH7.0 酸处理：0.5mM NaCl，0.16mM KH2PO4，0.16mM K2HPO4，0.2mM MgSO4，0.2mM CaSO4，pH5.0 碱处理：0.5mM NaCl，0.16mM KH2PO4，0.16mM K2HPO4，0.2mM MgSO4，0.2mM CaSO4，10mM NaHCO3，pH8.0/9.0 ...
实验设计: 白菜根盐胁迫
内容： 实验一材料：大白菜基因型/品种：自交系A03 检测部位：根分生区（H+）、根成熟区（Cd2+）检测指标：H+（流速、根表pH）、Cd2+（流速）处理： CK 200mM NaCl处理 2d 具体方案： H+、Cd2+ 200mM NaCl处理2d后，定点检测10分钟在，8重复/组实验二：离子浓度成像检测一、材料：大白菜二、基因型/品种：自交系A03 三、检测部位：根分生区四、检测指标：H+ 五、处理： CK 200mM NaCl处理 2d 材料：大白菜基因型：自交系A03 检测部位：根分生区（过渡区中点）检测指标：Ca2+、Na+、K+、Cl- 处理： CK 200mM NaCl处理 2d 具体方案： Ca2+预处理200mM NaCl处理6h后（处理时间可调整，因为Ca2+变化较快，所以盐处理时间比较短，处理2天时间较长可能信号变化不明显），定点检测10分钟，8重复/组 Ca2+实时处理200mM NaCl处理前检测5分钟，200mM NaCl处理10分钟后检测15-20分钟（经费允许可以持续检测30分钟），8重复/组 Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐碱胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐碱材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）胁迫组a.置于200mM NaCl中处理0.5/1/2h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐碱胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐碱材料的耐受机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）胁迫组置于200mM NaCl中处理2d后（时间点可以调整），记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+）【目的：查看盐碱胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐碱胁迫下排出去的K+更少】一般来说，耐盐碱材料，胁迫下排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）胁迫组 200mM NaCl胁迫后，立即检测 b.置于200mM NaCl中处理48h后（时间点可以调整），直接检测，记录10分钟，8重复/组 6. Cl-方案参考Na+ ...
实验设计: 玉米幼穗小花原基Ca
内容： 一、材料：玉米二、品种/基因型：突变体三、检测指标：Ca2+ 四、检测位点：玉米雌穗幼穗五、具体实验细节：突变体穗上正常的小花原基、突变的小花原基（在同一雌穗上）定点各自检测10min 六、重复：8 ...
实验设计: 油菜根低温瞬时
内容： 材料：两个油菜品种检测指标：Ca2+ 检测部位：根尖分生区（分生区Ca2+信号最明显）处理：对照、实时0℃低温处理对照：油菜正常状态下的Ca2+信号变化实时0℃低温处理：检测完正常状态下的Ca2+信号变化后，实时把检测环境变成0℃，检测时间不少于15分钟（根据实验的实际情况决定检测时长，以实际检测到的稳定Ca2+信号时间为准） ...
实验设计: 烟草根盐低温干旱
内容： 材料：烟草基因型/品种：PBI121-GFP、PBI121-2.1GFP、PBI121-2.2GFP 检测位点：根分生区【实验目的】前期的实验是看到了基因可以增强植物的抗逆性，现在想用NMT再验证一下方案一：预处理—利于观察离子转运的长时效应【盐胁迫—预处理】检测指标：Na+、K+ Na+吸收（测Na+）目的：查看盐胁迫下，谁的根部Na+进入的少。一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，根部吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录3分钟，6重复/组2）盐胁迫组a.置于250mM盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组 Na+外排（测Na+）目的：查看盐胁迫下，两种植物根部排Na+能力的差异。这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强。1）对照组置于测试液中检测，记录3分钟，6重复/组2）盐胁迫组置于250mM盐溶液中处理12h后检测，记录3分钟，6重复/组 K+外排/吸收（测K+）目的：查看盐胁迫下，植物根保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少。一般来说，耐盐材料，盐胁迫下根部排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，6重复/组 2）盐胁迫组置于盐溶液中处理12h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组【干旱胁迫—预处理】检测指标：Ca2+、H+ 具体方法：10% PEG处理12h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组【低温胁迫—预处理】检测指标：Ca2+ 具体方法：4℃低温处理12h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组方案二：瞬时处理—根据经验，实时处理后，离子转运信号变化相对较强，利于观察不用处理间的差异。【盐胁迫—瞬时处理】检测指标：Na+、K+ 具体方法 Na+250mM NaCl处理前定点检测3min，250mM NaCl处理前处理后定点检测10min，6重复/组 K+ 250mM NaCl处理前定点检测3min，250mM NaCl处理前处理后定点检测10min，6重复/组【干旱胁迫—瞬时处理】检测指标：Ca2+、H+ 具体方法：10% PEG处理前定点检测3min，10% PEG处理后定点检测10min，6重复/组【低温胁迫—瞬时处理】检测指标：Ca2+ 具体方法：4℃低温处理前定点检测3min，4℃低温处理后定点检测10min，6重复/组方案三材料：烟草基因型/品种：PBI121-GFP、PBI121-2.1GFP、PBI121-2.2GFP 三、检测位点：根分生区（过渡区中点）【实验目的】前期的实验是看到了基因可以增强植物的抗逆性，现在想用NMT再验证一下【盐胁迫—预处理】检测指标：Na+、K+ 具体方法：150mM NaCl处理24h后，定点检测5min，8重复/组【干旱胁迫—实时处理】检测指标：Ca2+、K+ 具体方法： Ca2+实时处理：15% PEG处理前检测5分钟，15% PEG处理检测10min，8重复/组 K+预处理：15% PEG处理5h后，定点检测5min，8重复/组【低温胁迫—实时处理】检测指标：Ca2+、K+ 具体方法： Ca2+实时处理：4℃低温处理前检测5分钟，4℃低温处理后检测10min，8重复/组 K+预处理：4℃低温处理5h后，定点检测5min，8重复/组测试液：盐胁迫测Na+：1mM NaCl，0.1mM CaCl2，pH6.0盐胁迫测K+：150mM NaCl，0.1mM CaCl2，0.1mM KCl，pH6.0 干旱胁迫测Ca2+、K+瞬时加药前：0.5mM CaCl2，0.5mM KCl，pH6.0瞬时加药后/预处理：15% PEG，0.5mM CaCl2，0.5mM KCl，pH6.0 低温胁迫测Ca2+、K+：0.1mM CaCl2，0.1mM KCl，pH6.0 ...
实验设计: 烟草铵硝扫点定点
内容： 材料：烤烟基因型/品种：1个对照、2个过表达株系、2个RNAi株系检测指标：NH4+、NO3- 检测位点：根【实验目的】分析不同氨基酸转运蛋白NtTAT（WT、OE、RNAi）NO3-和NH4+在膜上外排和内流的速率，检测氨基酸转运蛋白NtTAT是否直接影响了NO3-和NH4+氮素。（这是第一步实验，目的是想看烟草对铵硝的偏好性，老师预期是对硝偏好性大一些）重复：6 【具体方案】扫点实验：对照样品选取4个重复进行扫点实验，具体检测位点 NH4+：300μm（分生区）、800μm（分生区/伸长区）、1500μm（伸长区/成熟区）、7500μm（成熟区），每个点检测3min NO3-：800μm（分生区/伸长区）、1500μm（伸长区/成熟区）、2500μm（伸长区）、5000μm（成熟区）、7500μm（成熟区），每个点检测3min 定点实验：根据扫点实验结果，选择NH4+、NO3-吸收/差异最大的点进行定点实验，每个点检测5min 材料：烤烟基因型/品种：1个对照、2个过表达株系、2个RNAi株系三、检测指标：NO3- 四、检测位点：根【实验目的2】检测WT、OE、RNAi在不同浓度NO3-（0、0.1%、0.3%）下处理下氨基酸转运蛋白NtTAT（WT、OE、RNAi）中NO3-流速，探讨过表达氨基酸转运蛋白NtTAT材料是否耐更高浓度氮素四、重复：8 【具体方案】不同浓度NO3-处理3天后（时间点可根据实际情况调整），定点检测5min 材料：烤烟基因型/品种：1个对照、2个过表达株系、2个RNAi株系三、检测指标：NO3- 四、检测位点：根【实验目的3】分析氨基酸转运蛋白NtTAT（WT、OE、RNAi）利用不同浓度（假设两个浓度：高、低）的能量阻断剂处理下在合适的NO3浓度下（0、0.1%）氨基酸转运蛋白NtTAT是否存在依靠能量转运。四、重复：8 【具体方案】高、低浓度的能量阻断剂处理3天后（时间点可根据实际情况调整），定点检测5min ...
实验设计: 水稻根Cd
内容： 一、材料：水稻二、处理： 1）瞬时处理目的：Cd实时处理后，Cd2+吸收信号相对较强，有利益观察不同材料、不同处理间的差异 CK（20μM CdCl2） CK+5%DCD CK+10%DCD CK+0.5%DMPP CK+1%DMPP 2）预处理7d 目的：观察Cd长时处理效应 CK（20μM CdCl2） CK+5%DCD CK+10%DCD CK+0.5%DMPP CK+1%DMPP 三、检测指标：Cd2+ 四、检测位点：根成熟区五、具体实验细节： 1）瞬时处理前（CK）检测3min，5%DCD、10%DCD、0.5%DMPP、1%DMPP瞬时处理后检测15min，现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到15min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。 2）5%DCD、10%DCD、0.5%DMPP、1%DMPP处理7d后，检测5分钟稳定数据即可 ...
实验设计: 水稻根Cd、O2有无铁膜和Cd处理
内容： 检测样品：水稻检测样品品种：玉珍香、湘晚籼12 检测部位：根检测指标：Cd2+、O2 处理方式： 30 μM CdCl2+无铁膜（处理3h） 30 μM CdCl2+有铁膜（处理3h） 5 mM 硅酸钠+30 μM CdCl2+无铁膜（处理3h） 5 mM 硅酸钠+30 μM CdCl2+有铁膜（处理3h）【实验一：扫点检测】目的：确定Cd2+最大吸收位点检测位点：水稻根冠顶端、分生区、伸长区、成熟区测定时间：5min 检测指标：Cd2+ 重复数：4 具体内容：检测“30 μM CdCl2+无铁膜”处理组的样品即可确定后续定点检测的位点。【实验二：定点检测】目的：探究铁膜是如何影响镉胁迫下Cd2+转运的。检测位点：根据扫点结果确定/确定区域中有铁膜的位点和无铁膜的位点测定时间：5min 检测指标：Cd2+ 重复数：8 具体内容： 30μM CdCl2+无铁膜（该处理检测4个重复，其余处理检测8个重复）、30μM CdCl2+有铁膜、5mM 硅酸钠+30μM CdCl2+无铁膜、 5mM 硅酸钠+30 μM CdCl2+有铁膜定点检测5min。备注：该组实验可以检测同一条根上有铁膜的和没有铁膜的位点，探究在同一条根上，铁膜影响Cd2+吸收的机制。【实验三：定点检测】目的：探究O2在铁膜缓解镉胁迫中的作用。检测位点：根据Cd2+扫点结果确定测定时间：5min 检测指标：O2 重复数：8 具体内容：30μM CdCl2+无铁膜、30μM ...
实验设计: 山定子砧木根不同基因型H
内容： 材料：山定子砧木基因型：WT1、WT2、WT3、WT4、OE1、OE2、OE3、OE4 检测部位：根分生区检测指标：H+ 具体方案：定点检测5min，8重复/组 ...
实验设计: 苹果砧木根低N处理NO3-
内容： 材料：转基因苹果砧木检测部位：根成熟区（约距根尖3000μm）检测指标：NO3- 处理：低氮（0.3 mM NO3-）处理24 h 低氮24 h +原钒酸钠处理40 min 具体方案：定点检测5min，4重复/组（根据现场结果可能会增加至8个重复） ...
实验设计: 苹果果实病斑Ca、Mg、K
内容： 一、材料：苹果果实二、检测部位：病斑处、非病斑处（检测靠近果肉的那一侧）三、检测指标：Ca2+、Mg2+、K+ 四、处理：正常健康的苹果发病的病斑中心病斑边缘1-2mm处同一个发病的果子上，远离病斑处五、具体方案：、2)均选择的靠近花萼一端，定点检测5min，8重复/组 ...

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