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实验设计
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盐胁迫+硝酸铵
内容:
执行方案 第一阶段 材料:耐盐,不耐盐 处理:对照(正常培养),盐,盐+硝酸铵 检测指标:钠,钾 具体方案: 1.钠外排(测Na+) 【目的:查看硝酸铵处理是否能促进盐胁迫下,棉花根排Na+速率】 材料:对照组(正常培养的2种样品) 1)对照组 置于-硝酸铵-盐测试液中,平衡20分钟后检测伸长区(+代表有,-代表无),记录3分钟,8重复/组 b.置于+硝酸铵-盐测试液中,平衡20分钟后检测伸长区,记录3分钟,8重复/组 2)处理组 a.置于-硝酸铵+盐(150 mM NaCl)培养液中处理12小时后,移至-硝酸铵-盐测试液中平衡20分钟,检测伸长区,记录5分钟,8重复/组 b.置于+硝酸铵+盐培养液(20 mM NH4NO3,150 mM NaCl)中处理12小时后,移至+硝酸铵-盐测试液中平衡20分钟,检测伸长区,记录5分钟,8重复/组 3)溶液配方 -硝酸铵-盐测试液:0.5 NaCl,pH 6.0 +硝酸铵-盐测试液:20 NH4NO3,0.5 NaCl,pH 6.0 2.钠吸收(测Na+) 【目的:查看硝酸铵处理是否能抑制盐胁迫下,棉花根的吸Na+速率】 材料:对照组(正常培养的2种样品) 1)对照组 置于-硝酸铵-盐测试液中检测 b.置于+硝酸铵-盐测试液中检测 2)处理组 a.置于-硝酸铵+盐处理液中处理20分钟后,置于改良-硝酸铵+盐测试液中,2分钟后直接检测,记录5分钟,8重复/组 b.置于+硝酸铵+盐处理液中处理20分钟后,置于改良+硝酸铵+盐测试液中,2分钟后直接检测,记录5分钟,8重复/组 3)溶液配方 -硝酸铵-盐测试液:0.5 NaCl,pH 6.0 +硝酸铵-盐测试液:20 NH4NO3,0.5 NaCl,pH 6.0 改良-硝酸铵+盐测试液:75 mM NaCl,pH 6.0(7.5/75 mM NaCl,pH 6.0作为高低校正液,斜率符合要求即可) 改良+硝酸铵+盐测试液:20 NH4NO3,75 mM ...
实验设计
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盐胁迫
内容:
材料:样品A、样品B、样品C 处理方式:盐胁迫12h(互为对照) 检测位点:定点检测,根分生区 重复数:8 具体方案 Na+吸收(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,谁的根部Na+进入的少】一般来说,耐盐材料在盐胁迫下,根部吸Na+速率更小。1)对照组置于测试液中检测,记录5分钟,8重复/组2)盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后,直接检测,记录5分钟,8重复/组 Na+外排(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,两种植物根部排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制,是不是根部排Na+能力更强1)对照组置于测试液中检测,记录5分钟,8重复/组2)盐胁迫组置于盐溶液中处理12h后(时间点可以调整),移至测试液中放置20分钟后检测,记录5分钟,8重复/组 K+外排/吸收(测K+) 【目的:查看盐胁迫下,植物根保K+能力,也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说,耐盐材料,盐胁迫下根部排K+更少 1)对照组 置于测试液中检测,记录5分钟,8重复/组 2)盐胁迫组 a.盐胁迫后,立即检测 b.置于盐溶液中处理12h后(时间点可以调整),直接检测,记录5分钟,8重复/组 ...
实验设计
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小麦根Na、K盐胁迫
内容:
材料:小麦 处理:250mM NaCl处理6/12/24/48h后(时间点可以调整) 检测指标:Na+,K+ 检测部位:根分生区 具体方案: Na+吸收(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,谁的Na+进入的少】一般来说,耐盐材料在盐胁迫下,吸Na+速率更小。1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后,直接检测,记录10分钟,8重复/组 Na+外排(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制,是不是根部排Na+能力更强1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后(时间点可以调整),记录10分钟,8重复/组 K+吸收/外排(测K+) 【目的:查看盐胁迫下,植物保K+能力,也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说,耐盐材料,盐胁迫下排K+更少 1)对照组 置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组 2)盐胁迫组 a.盐胁迫后,立即检测(即250mM NaCl瞬时处理,处理前检测5min,250mM NaCl处理后检测10min) b.置于盐溶液中处理6/12/24/48h后(时间点可以调整),直接检测,记录10分钟,8重复/组 ...
实验设计
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小麦、玉米、水稻根Cd预处理
内容:
检测样品:小麦、玉米、水稻 检测部位:根伸长区 检测指标:Cd2+ 处理 CdCl2(对照)处理24h DNP+CdCl2处理24h TEA+CdCl2处理24h Ca2+抑制剂1+CdCl2处理24h Ca2+抑制剂2+CdCl2处理24h H+抑制剂+CdCl2处理24h 5. 具体实施方案: 定点检测5分钟 6. 重复数:8 ...
实验设计
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铜绿微囊藻不同颜色光处理
内容:
【方案一:预处理(长时处理)】 材料:铜绿微囊藻 处理: 橙光+10mg/L KNO3 橙光+10mg/L NH4Cl 红光+10mg/L KNO3 红光+10mg/L NH4Cl 白光+10mg/L KNO3 白光+10mg/L NH4Cl 绿光+10mg/L KNO3 绿光+10mg/L NH4Cl 蓝光+10mg/L KNO3 蓝光+10mg/L NH4Cl 检测指标:NH4+、NO3- 检测位点:藻细胞表面 重复:6 具体实验内容 橙光、红光处理约2h/6h/12h/24h/3d/7d/14d后的样品,定点检测10min ============================ 该实验方案设置的时间点较多,一个是可以看出大概处理多久样品的铵硝吸收差异、变化最大(也可以看出样品短时和长时铵硝吸收效应);另一个是因为NMT检测的是过程量, 发生在结果量之前,建议老师把处理时间往前提。 【方案二:实时处理】 材料:铜绿微囊藻 处理: 10mg/L KNO3 10mg/L NH4Cl 检测指标:NH4+、NO3- 检测位点:藻细胞表面 重复:6 具体实验内容 2500lux的橙光、红光处理前检测3min,2500lux的橙光、红光处理后的样品,定点检测10min ================== 该方案是想看实时处理下,样品的铵硝吸收情况,表现的是短时吸收效应,仅供参考。 ...
实验设计
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水稻叶肉
内容:
一、材料:水稻 二、基因型/品种:WT、mutant 三、检测部位:叶肉细胞 四、检测指标:Ca2+ 五、处理: 无处理 10 mg/mL chitin、病原菌处理24h 10 mg/mL chitin、病原菌瞬时处理 六、具体方案: 处理1、2:无处理、10 mg/mL chitin处理24h、病原菌处理24h后,定点检测叶肉细胞10min,8重复/组 处理3:10 mg/mL chitin、病原菌处理前检测5min,10 mg/mL chitin、病原菌处理后,检测10分钟,8重复/组 ...
实验设计
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水稻根扫点定点
内容:
【方案一:扫点检测】 检测样品:水稻 检测部位:距根尖300、800、1500、2500、7500、15000μm 检测指标:NH4+、NO3-、K+ 处理方式: 空白对照 20nM量子点处理3d 5. 具体实施方案: 对照、20nM量子点处理3d后,进行扫点检测,每个点检测3min 6. 重复数:8 【方案二:定点检测】 检测样品:水稻 检测部位:根成熟区 检测指标:NH4+、NO3-、K+ 处理方式: 空白对照 20nM量子点处理3d 5. 具体实施方案: 对照、20nM量子点处理3d后定点检测10min 6. 重复数:8 【方案三】 检测样品:水稻 检测部位:扫点+定点 检测指标:NH4+、NO3-、K+ 处理方式: 空白对照 20nM量子点处理3d 5. 具体实施方案: 1)使用对照进行扫点检测距根尖300、800、1500、2500、7500、15000μm这6个位点,4重复 2)根据扫点结果,确定最大吸收位点,进行定点检测,8重复/组 ...
实验设计
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水稻根预处理、瞬时
内容:
【方案一:预处理(长时处理)】 目的:观察Cd长时处理效应 材料:水稻 处理: 无AMF益生菌 无AMF益生菌+ 5ppm CdCl2 有AMF益生菌 有AMF益生菌+ 5ppm CdCl2 检测指标:Cd2+ 检测位点:根成熟区(Cd2+在成熟区变化较明显) 重复:8 具体实验内容 5ppm CdCl2种植5个月后,定点检测水稻根成熟区5min 【方案二:实时处理】 目的:Cd实时处理后,Cd2+的吸收信号相对较强,有利益观察不用处理间的差异 材料:水稻 处理: 无AMF益生菌,5ppm CdCl2 实时处理 有AMF益生菌,5ppm CdCl2实时处理 检测指标:Cd2+ 检测位点:根成熟区(Cd2+在成熟区变化较明显) 重复:8 具体实验内容 5ppm CdCl2处理前检测5min,5ppm CdCl2处理后检测10min ...
实验设计
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水稻根K泄露
内容:
【方案一】 目的:观察整条根的K+泄露情况 检测样品:水稻 基因型:突变体、WT 检测部位:根分生区、伸长区、成熟区 检测指标:K+ 具体实施方案:检测距根尖500(分生区)、1500(伸长区)、7500(成熟区)μm这3个位点,每个点检测5分钟 重复数:8 【方案二】 检测样品:水稻 基因型:突变体、WT 检测部位:根分生区 检测指标:K+ 具体实施方案:定点检测5分钟 重复数:8 ...
实验设计
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水稻根ZnSO4处理
内容:
一、材料:水稻(WT、OE、RNAi) 二、检测指标:Ca2+ 三、检测位点:根分生区过渡区 四、处理: a.对照 b.0.4mM ZnSO4 c.4mM ZnSO4 五、具体实验细节: 0.4/4mM ZnSO4处理前检测5min,0.4/4mM ZnSO4实时处理后处理后检测10min 六、重复数:8 ...
实验设计
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芍药真菌侵染
内容:
一、材料:芍药 二、处理:对照、三种真菌侵染根部 三、检测指标:Na+,K+ 四、检测部位:根 五、具体方案: Na+吸收(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,谁的根部Na+进入的少】一般来说,耐盐材料在盐胁迫下,根部吸Na+速率更小。1)对照组置于测试液中检测,记录5分钟,8重复/组2)真菌侵染组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后,直接检测,记录5分钟,8重复/组 Na+外排(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,两种植物根部排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制,是不是根部排Na+能力更强1)对照组置于测试液中检测,记录5分钟,8重复/组2)真菌侵染组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后(时间点可以调整),移至测试液中放置20分钟后检测,记录5分钟,8重复/组 K+外排(测K+) 【目的:查看盐胁迫下,植物根保K+能力,也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说,耐盐材料,盐胁迫下根部排K+更少 1)对照组 置于测试液中检测,记录5分钟,8重复/组 2)真菌侵染组 a.盐胁迫后,立即检测 b.置于盐溶液中处理6、12、24、48h后(时间点可以调整),直接检测,记录5分钟,8重复/组 ...
实验设计
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青鳉鳃纳米颗粒处理
内容:
【方案一】 目的:观察纳米颗粒的长时处理效应 材料:青鳉 检测部位:鳃 检测指标:Na+、Cl-、NH4+、H+(pH) 处理:3种不同尺寸的纳米颗粒处理1d、3d、5d、7d 具体方案: 定点检测5分钟,8重复/组 【方案二】 目的:纳米颗粒实时处理后信号变化相对较强,有利于观察不用处理间的差异 材料:青鳉 检测部位:鳃 检测指标:Na+、Cl-、NH4+、H+(pH) 处理:3种不同尺寸的纳米颗粒实时处理 具体方案: 加入纳米颗粒前检测5分钟,加入纳米颗粒后检测10分钟 ...
实验设计
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葡萄铵硝转运情况
内容:
一、材料:葡萄 二、检测指标:NH4+、NO3- 三、检测位点:根成熟区、茎、叶肉细胞 【实验目的】在正常的土壤中加入尿素会导致铵态氮会转化成硝态氮,但是植物吸收不了这么多硝态氮就会流失,加入DMPP可以抑制铵态氮向硝态氮转化。这个实验就是探究加入DMPP后铵态氮、硝态氮的利用分配,植株各部位吸收的铵态氮和硝态氮有无增加,对生产中果实产量和品质的影响。 四、重复:6 五、处理 对照 0.1%DMPP 0.2%DMPP 0.3%DMPP 在施肥前1天和施肥后3天检测 【方案一】实时处理 目的:根据经验,实时处理后,NH4+、NO3-的信号变化相对较强,有利于观察不用处理间的差异。 具体内容:DMPP处理前样品检测3min,0.1%、0.2%、0.3%DMPP实时加药处理后,定点检测10min。 【方案二】预处理处理 目的:观察NH4+、NO3-吸收的长时效应 具体内容:0.1%、0.2%、0.3%DMPP处理前1天的样品定点检测5min,0.1%、0.2%、0.3%DMPP处理后3天的样品定点检测5min。 ...
实验设计
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葡萄NaC+硫酸铵处理
内容:
【方案一:预处理(长时处理)】 材料:葡萄 处理: CK 200mM NaCl +0.2mM硫酸铵处理2、4、6d 200mM NaCl +2mM硫酸铵处理2、4、6d 检测指标:Na+、H+、IAA、NO3-、NH4+ 检测部位:根分生区过渡区(Na+、H+、IAA)、成熟区(NO3-、NH4+) 具体方案: Na+外排(测Na+)【目的:查看盐胁迫下,两种植物排Na+能力的差异】1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)处理组复合溶液处理2、4、6d后,定点检测10分钟,8重复/组 H+、IAA 、NO3-、NH4+ 复合溶液处理2、4、6d后,定点检测10分钟,8重复/组 【方案二:瞬时处理】 材料:葡萄 处理: CK 200mM NaCl +0.2mM硫酸铵处理2、4、6d 200mM NaCl +2mM硫酸铵处理2、4、6d 检测指标:Na+、H+、IAA、NO3-、NH4+ 检测部位:根分生区过渡区(Na+、H+、IAA)、成熟区(NO3-、NH4+) 具体方案: Na+吸收(测Na+) 【目的:查看盐胁迫下,谁的Na+进入的少】 一般来说,耐盐材料在盐胁迫下,吸Na+速率更小。 1)对照组 置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组 2)盐胁迫组 0.2、2mM硫酸铵处理2、4、6d后,200mM NaCl处理0.5h后,直接检测,记录10分钟,8重复/组 2. H+、IAA、NO3-、NH4+ 0.2mM、2mM硫酸铵处理2、4、6d后,200mM NaCl瞬时处理前检测3min,200mM NaCl瞬时处理后检测10min ...
实验设计
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拟南芥根真菌滤液
内容:
材料:拟南芥 处理: 纯化真菌滤液1 纯化真菌滤液2 纯化真菌滤液3 检测指标:H+ 检测部位:根分生区(过渡区中点) 具体方案: 纯化真菌滤液1、2、3处理拟南芥根24h后(处理时间可调整),定点检测10分钟 纯化真菌滤液1、2、3处理前检测5分钟,纯化真菌滤液1、2、3实时处理后检测10分钟 七、重复数:8 ...
实验设计
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拟南芥根PEG
内容:
材料:拟南芥 基因型:WT、OE1、OE2、RNAi 检测部位:根分生区(过渡区中点) 检测指标:Ca2+、Na+、K+、Cl- 处理: 150mM NaCl 145mM NaCl+5mM Na2CO3 10%PEG6000 具体方案: Ca2+预处理150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理6h后(处理时间可调整),定点检测10分钟在,8重复/组 Ca2+实时处理150mM NaCl、145mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理前检测5分钟,150mM NaCl、145mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理10min后检测15-20分钟(经费允许可以持续检测30分钟),8重复/组 Na+吸收(测Na+)【目的:查看盐碱胁迫下,谁的Na+进入的少】一般来说,耐盐碱材料在盐胁迫下,吸Na+速率更小。1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)胁迫组a.置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3中处理0.5/1/2h后,直接检测,记录10分钟,8重复/组 Na+外排(测Na+)【目的:查看盐碱胁迫下,两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐碱材料的耐受机制,是不是根部排Na+能力更强1)对照组置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组2)胁迫组置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3中处理6/12/24/48h后(时间点可以调整),记录10分钟,8重复/组 K+吸收/外排(测K+) 【目的:查看盐碱胁迫下,植物保K+能力,也就是哪种植物在盐碱胁迫下排出去的K+更少】 一般来说,耐盐碱材料,胁迫下排K+更少 1)对照组 置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组 2)胁迫组 150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM ...
实验设计
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拟南芥根NaHCO3处理
内容:
实验1—Ca2+、H+、K+流速 检测样品:拟南芥 检测部位:根部伸长区—老师写的是成熟区(距离根冠1000 μm以上) 检测样品品种:WT、HA12#17、HA12#58、HA16#3、HA16#4、HA24#13、HA24#14 处理方式:无处理(对照)、7 mM 的NaHCO3处理24 h-48h(时间点不确定,暂定24和48h) 重复数:8 检测指标:Na+、H+、K+ 具体方案 对照组、7mM NaHCO3胁迫24h、48h后定点检测5 min 目的:观察NaHCO3长时处理效应,比较植物耐碱胁迫的能力 参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/jgVHMzXIJp8mEvsuT6Ny3w https://mp.weixin.qq.com/s/hoDMtVPbC0jxqVZnvs7kRA ...
实验设计
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拟南芥保卫细胞瞬时ABA
内容:
材料:拟南芥 基因型:WT、突变体 检测部位:保卫细胞 检测指标:Ca2+ 处理:10μM ABA实时处理 具体方案: WT:10μM ABA处理前检测5min,10μM ABA处理后检测20min(3个重复,用于确定信号变化比较大的时间段) 10μM ABA处理前检测5min,10μM ABA处理后检测10min(5个重复,假如根据上面的三个重复确定数据在加药后10min可以稳定,则之后的样品都检测10min) 突变体:10μM ABA处理前检测5min,10μM ABA处理后检测10min(8重复) ...
设备操作
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如何确定根尖位置的最大流速?
内容:
确定根尖最大流速的位置,常用方法是扫点实验,比如:在根冠、在距离根冠300um、500um、800um……位置分别检测 3~5分钟,6-8个生物学重复,作比较即可。 ...
设备操作
:
如何确定视频采集软件图像中的距离?
内容:
(1)Toup View软件可以通过物镜测微尺校准软件中的标尺,然后使用软件中的测量功能即可。(可在流速云查看《ToupView摄像头软件图像直线距离测量方法(适用于流速检测软件 imFlxes V2.X)》)(2)通过运动控制,移动传感器的尖端,来测量视野距离或者样品材料的长度。比如,运动控制步距调整为50um或者100um,打开Motion后通过键盘输入移动指令,即移动50um或者100um。 ...
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