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实验设计: 拟南芥根叶酸+硝酸钾处理 NO3-
内容： 方案一材料：拟南芥品种：WT、atdfb-3 处理： 9.4mM KNO3处理1d、3d、6d 9.4mM KNO3 +叶酸处理1d、3d、6d（仅处理atdfb-3突变体）检测指标：NO3- 检测部位：根成熟区具体方案：处理1d、3d、6d后，检测10分钟稳定数据七、重复数：6 方案二材料：拟南芥品种：WT、atdfb-3 处理： 9.4mM KNO3处理6d 9.4mM KNO3 +叶酸实时处理（仅处理atdfb-3突变体）检测指标：NO3- 检测部位：根成熟区具体方案： 9.4mM KNO3处理6d后，检测10分钟稳定数据，8重复/组 9.4mM KNO3 +叶酸实时处理前检测5分钟，9.4mM KNO3 +叶酸实时处理后持续检测20分钟（摸索最佳处理时间），4重复/组测试液 9.4mM KNO3，0.1mM CaCl2，pH6.0 叶酸，9.4mM KNO3，0.1mM CaCl2，pH6.0 2021.9.9 材料：拟南芥品种：WT、atdfb-3 处理： 9.4mM KNO3处理6d 9.4mM KNO3+50μM叶酸处理6d 检测指标：NO3- 检测部位：根成熟区具体方案：处理6d后，检测10分钟稳定数据七、重复数：6 ...
实验设计: 拟南芥根盐胁迫
内容： 周四早上：先进行周五早上盐胁迫苗子的处理（需要NaCl胁迫24小时）周五：上午对前一天NaCl处理的苗子进行测试实验1、基因A对盐胁迫介导的跨膜离子流动的影响，共12个样品检测样品：拟南芥检测部位：根检测样品品种：A和B（*2）检测指标：Na+外排处理方式：正常培养5~6天后，100mM NaCl处理24h后，放入测试液。检测位点：扫点：根毛区、分生区、伸长区（*3），优先测根毛区。测定时间：对照组：检测3分钟（三个区域测同一棵苗，进行扫点）盐胁迫组：测5分钟（三个区域测同一棵苗，进行扫点）重复数：3（*3）处理液：NaCl（100mM），pH5.8测试液：NaCl（0.5mM），pH5.8 实验2、基因A对冷胁迫介导的跨膜离子流动的影响，共12个样品检测样品：拟南芥检测部位：根检测样品品种：A和B（*2）检测指标：Ca2+ 处理方式：正常培养后冷胁迫瞬时处理检测位点：分生区、伸长区（*2），优先测分生区。测定时间：处理前：检测3分钟4℃处理瞬时处理后：检测10分钟（处理前处理后测同一棵苗）重复数：3（*3）测试液：0.5 mM CaCl2，pH5.8低温测试液：0.5 mM CaCl2，pH5.8 ...
实验设计: 拟南芥根Na、K盐胁迫
内容： 材料：拟南芥基因型：WT、转基因1、转基因2 处理：200mM NaCl处理24h 检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区（过渡区中间）具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于200mM NaCl中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于200mM NaCl中处理24h后，记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+）【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 200mM NaCl胁迫后，立即检测（200mM NaCl实时处理） b.置于200mM NaCl中处理24h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组（200mM NaCl预处理24h） ...
实验设计: 棉花纤维胚珠H
内容： 检测样品：棉花基因型：WT、转基因1、转基因2 检测部位：棉花纤维顶端、侧边处理：1DPA、3DPA 检测指标：H+ 具体实施方案：所有材料选择同一位置的胚珠上相同区域的纤维细胞进行检测，检测10分钟，8重复/组 ========= 测试液：0.1mM CaCl2，pH6.0 ...
实验设计: 梨果皮CaCl2处理
内容： 【方案一】材料：梨果实检测部位：果皮（在注射孔周围取样，检测靠近果肉的那一侧）检测指标：Ca2+（流速）、H2O2（流速）处理：注射空载转基因1 转基因1+2%CaCl2浸泡5s 转基因2 转基因2+2%CaCl2浸泡5s 2%CaCl2实时处理具体方案： 1、2、3、4、5组处理定点检测10分钟，8重复/组 6组处理2%CaCl2实时处理后持续监测15分钟，8重复/组测试液：0.01mM CaCl2，pH6.0 【方案二】材料：梨果实检测部位：果皮（在注射孔周围取样，检测靠近果肉的那一侧）检测指标：Ca2+（检测果实内部质外体浓度）、H2O2（浓度）处理：注射空载转基因1 转基因1+2%CaCl2浸泡5s 转基因2 转基因2+2%CaCl2浸泡5s 具体方案：定点检测，8重复/组测试液：0.01mM CaCl2，pH6.0 ...
实验设计: 番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容： 实验1—IAA、H2O2、H+、Ca2+流速检测样品：番茄检测部位：叶肉细胞检测样品品种：AC 检测指标：IAA、H2O2、H+、Ca2+ 处理方式：常温+光照（光照持续伴随样品）常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 4℃低温瞬时+光照（光照持续伴随样品） 4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h+常温+光照（光照持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h+4℃低温瞬时+光照（光照持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品）检测位点：叶肉细胞定点检测测定时间： a、b、e、f组定点检测5min c、d、g、h组检测20min（先看前2-3个样品的数据稳定情况再进行时间调整）重复数：8 测试液IAA、H2O2、H+、Ca2+：0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH ...
实验设计: 沉水植物龙舌草叶片表面碳酸根处理
内容： 材料：沉水植物龙舌草处理： 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.05mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.3mM DIDS+0.05mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.2mM DES+0.05mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.3mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.3mM DIDS+0.3mM KCl 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.2mM DES+0.3mM KCl 三、检测指标：H+、Cl- 四、检测位点：叶片表面（正面和反面。非叶肉细胞，不用撕开。）五、重复：8 六、具体方案在①-⑥处理30分钟后，在载物台上静置7分钟，定点检测叶片正、反面各5min 七、测试液 H+（提前配置，静置4h以上使用）： 0.5mM NaHCO3+0.5mM KHCO3+0.05mM ...
实验设计: 昆虫触角
内容： 检测样品：昆虫检测部位：触角检测指标：K+ 检测位点及测定时间：扫点测量，每个位点测定稳定数据时间3min 测试液：0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mMNa2SO4, pH 6.0 ...
实验设计: 番茄叶肉细胞/低温/光照黑暗/瞬时
内容： 实验1—H+、Ca2+流速检测样品：番茄检测部位：叶肉细胞检测样品品种：AC 检测指标：H+、Ca2+ 处理方式：常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h +4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品）检测位点：叶肉细胞定点检测测定时间： a、c组定点检测5min b、d组检测15min （现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到15min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。）重复数：8 测试液 H+、Ca2+：0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0 实验3—Ca2+流速检测样品：番茄检测部位：叶肉细胞检测样品品种：沉默A、沉默B、沉默C、沉默D、沉默E 检测指标：Ca2+ 处理方式：常温+黑暗（黑暗持续伴随样品） 4℃低温瞬时+黑暗（黑暗持续伴随样品） 27mM CaCl2处理2h+常温+黑暗 27mM ...
实验设计: 拟南芥下表皮保卫细胞
内容： 检测样品是：拟南芥；检测部位是：拟南芥下表皮保卫细胞品种：fim1-1、fim1-2、fim2-2 检测指标：H2O2 处理方式：50 μM ABA处理时间为15min 检测位点：定点测量拟南芥下表皮保卫细胞没有处理的样品检测10min，50 μM ABA处理15min后检测10min 重复数：3 测试液处理前：2.0mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 5.0 mM MES, pH 6.0；处理后：50 μM ABA, 2.0mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 5.0 mM MES, pH ...
设备操作: 测定离子时，信号波动很大，数据不稳定怎么办？
内容： （1）换成空白测试液，将传感器（电极）动态信号上下限范围调整为正负1.5uV，观察数据是否在此范围内，如果在此范围，有可能是样品造成的，建议更换样品。（2）在静态模式下观察传感器（电极）电位，在上下限0.1V范围内是否平稳（一条水平直线）。（3）在显微镜下观察传感器（电极）尖端是否正常，灌充液是否连续，如出现断层或大的气泡，重新制作传感器（电极）；LIX如果漏光，重新灌充LIX。（4）检查参比电极内液，如果不充足，补充3M KCl至没过银丝镀层。（5）检查传感器（电极）固定架上的银丝氯化层是否完好，如果不完好需要重新进行氯化，或者银丝过细更换新的传感器（电极）固定架。（6）依次更换测试液（标准检测溶液）、传感器（电极）（重新制作，重新蘸LIX，重配灌充液）、更换其他种类传感器（电极）。（7）将前置放大器两接口用线短接，观察静态电位，如仍然存在静态电位波动，可以给前置放大器外壳接一根地线。（8）更换前置放大器。（9）关闭除数据采集系统和信号处理器外的所有设备电源（显微镜最好将电源线也拔下来），之后一次打开各个设备的电源，观察静态电位变化，当打开某一设备电源，静态电位出现明显波动时，需要给该设备及与该设备相连的设备接上地线。其中显微镜的地线需要固定在显微镜背面的内六角螺丝上；电动三维运动平台的电机也需要连接地线（可以连在固定电机的螺丝上）；其他设备接在该设备背面的任意接口螺丝上即可。 ...
设备操作: 测试过程中，离子电位偏离正常值较多怎么办？
内容： （1）换成空白测试液，如果电位能回到正常数值，则可能是样品自身的原因造成电位漂移。（2）重新校正传感器（电极），看斜率是否能达到要求。（3）重新制作传感器（电极），按步骤操作。（4）如果还会出现以上现象，依次更换测试液（标准检测溶液）、传感器（电极）、其他种类传感器（电极）。（5）传感器（电极）Holder可重新打磨氯化，或者更换新的。（6）更换参比电极。（7）更换前置放大器。 ...
设备操作: 启动测试时，X轴运动异常，无法反复运动，只沿着X轴右侧移动。
内容： （1）先检查运动开关状态、插拔连接线，（2）打开数据采集系统重新插拔运动采集卡。（3）如果还是无法解决，需要联系售后工程师进行返厂维修。 ...
设备操作: 测试时找不到分子传感器尖端
内容： 金属（分子）传感器在Y轴调节“横扫”物镜时，转动三维旋钮时要放慢速度，金属传感器的尖端弹性较大，容易抖动，容易出现看不到虚影的情况。 ...
设备操作: 分子传感器极化时电流值不在正常范围
内容： （1）按照流速云中的测试液配方重新配制测试液。（2）联系售后工程师解决。 ...
设备操作: 测试K+时，第一支传感器校正没有问题，第二支传感器校正不出来，斜率总是差一些。
内容： （1）更换新的校正溶液（2）LIX Holder中的LIX长时间暴露在空气中，已经变质，重新蘸取LIX制作传感器尝试。 ...
设备操作: 测试K+一段时间后，软件没有读数了怎么办？
内容： （1）检查K+ LIX是否已经变短，重新灌充LIX；（2）查看背景电位变化情况，漂移超出范围重新校正；（3）重新更换新的传感器。 ...
设备操作: 一次测试中传感器（电极）需要校正几次？
内容： 正常情况下传感器（电极）在一次测试中校正一次，如果测试中发现电位漂移严重即跟在测试液中校正时的电位相比超过正常范围（二价离子超过±5，一价离子超过±10）则需要重新校正。 ...
设备操作: 测试开始时传感器接近样品，信号出现较大波动怎么办？
内容： 可以依次更换样品的另一个测试点、更换测试液；波动仍然存在，更换空白测试液测定；若没有波动，说明可能是样品问题，更换新样品。 ...
设备操作: 测试过程中，信号出现波动怎么办？
内容： 大多数是样品或溶液本身造成的，可以依次更换另一个测试点、更换测试液；波动仍然存在，更换空白测试液测定；若没有波动，说明可能是样品问题，更换新样品。 ...

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