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• 实验设计: 水稻根ZnSO4处理
  内容： 一、材料：水稻（WT、OE、RNAi） 二、检测指标：Ca2+ 三、检测位点：根分生区过渡区 四、处理： a.对照 b.0.4mM ZnSO4 c.4mM ZnSO4 五、具体实验细节： 0.4/4mM ZnSO4处理前检测5min，0.4/4mM ZnSO4实时处理后处理后检测10min 六、重复数：8 ...
• 实验设计: 芍药真菌侵染
  内容： 一、材料：芍药 二、处理：对照、三种真菌侵染根部 三、检测指标：Na+，K+ 四、检测部位：根 五、具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的根部Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，根部吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）真菌侵染组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录5分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物根部排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）真菌侵染组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），移至测试液中放置20分钟后检测，记录5分钟，8重复/组 K+外排（测K+） 【目的：查看盐胁迫下，植物根保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下根部排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组 2）真菌侵染组 a.盐胁迫后，立即检测 b.置于盐溶液中处理6、12、24、48h后（时间点可以调整），直接检测，记录5分钟，8重复/组 ...
• 实验设计: 葡萄铵硝转运情况
  内容： 一、材料：葡萄 二、检测指标：NH4+、NO3- 三、检测位点：根成熟区、茎、叶肉细胞 【实验目的】在正常的土壤中加入尿素会导致铵态氮会转化成硝态氮，但是植物吸收不了这么多硝态氮就会流失，加入DMPP可以抑制铵态氮向硝态氮转化。这个实验就是探究加入DMPP后铵态氮、硝态氮的利用分配，植株各部位吸收的铵态氮和硝态氮有无增加，对生产中果实产量和品质的影响。 四、重复：6 五、处理 对照 0.1%DMPP 0.2%DMPP 0.3%DMPP 在施肥前1天和施肥后3天检测 【方案一】实时处理 目的：根据经验，实时处理后，NH4+、NO3-的信号变化相对较强，有利于观察不用处理间的差异。 具体内容：DMPP处理前样品检测3min，0.1%、0.2%、0.3%DMPP实时加药处理后，定点检测10min。 【方案二】预处理处理 目的：观察NH4+、NO3-吸收的长时效应 具体内容：0.1%、0.2%、0.3%DMPP处理前1天的样品定点检测5min，0.1%、0.2%、0.3%DMPP处理后3天的样品定点检测5min。 ...
• 实验设计: 葡萄NaC+硫酸铵处理
  内容： 【方案一：预处理（长时处理）】 材料：葡萄 处理： CK 200mM NaCl +0.2mM硫酸铵处理2、4、6d 200mM NaCl +2mM硫酸铵处理2、4、6d 检测指标：Na+、H+、IAA、NO3-、NH4+ 检测部位：根分生区过渡区（Na+、H+、IAA）、成熟区（NO3-、NH4+） 具体方案：  Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）处理组复合溶液处理2、4、6d后，定点检测10分钟，8重复/组 H+、IAA 、NO3-、NH4+ 复合溶液处理2、4、6d后，定点检测10分钟，8重复/组     【方案二：瞬时处理】 材料：葡萄 处理： CK 200mM NaCl +0.2mM硫酸铵处理2、4、6d 200mM NaCl +2mM硫酸铵处理2、4、6d 检测指标：Na+、H+、IAA、NO3-、NH4+ 检测部位：根分生区过渡区（Na+、H+、IAA）、成熟区（NO3-、NH4+） 具体方案： Na+吸收（测Na+） 【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】 一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。 1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 0.2、2mM硫酸铵处理2、4、6d后，200mM NaCl处理0.5h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组 2. H+、IAA、NO3-、NH4+ 0.2mM、2mM硫酸铵处理2、4、6d后，200mM NaCl瞬时处理前检测3min，200mM NaCl瞬时处理后检测10min ...
• 实验设计: 拟南芥根真菌滤液
  内容： 材料：拟南芥 处理： 纯化真菌滤液1 纯化真菌滤液2 纯化真菌滤液3 检测指标：H+ 检测部位：根分生区（过渡区中点） 具体方案： 纯化真菌滤液1、2、3处理拟南芥根24h后（处理时间可调整），定点检测10分钟 纯化真菌滤液1、2、3处理前检测5分钟，纯化真菌滤液1、2、3实时处理后检测10分钟 七、重复数：8 ...
• 实验设计: 拟南芥根PEG
  内容： 材料：拟南芥 基因型：WT、OE1、OE2、RNAi 检测部位：根分生区（过渡区中点） 检测指标：Ca2+、Na+、K+、Cl- 处理： 150mM NaCl 145mM NaCl+5mM Na2CO3 10%PEG6000 具体方案： Ca2+预处理150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理6h后（处理时间可调整），定点检测10分钟在，8重复/组 Ca2+实时处理150mM NaCl、145mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理前检测5分钟，150mM NaCl、145mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理10min后检测15-20分钟（经费允许可以持续检测30分钟），8重复/组 Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐碱胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐碱材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）胁迫组a.置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3中处理0.5/1/2h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐碱胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐碱材料的耐受机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）胁迫组置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+） 【目的：查看盐碱胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐碱胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐碱材料，胁迫下排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）胁迫组 150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM ...
• 实验设计: 拟南芥根NaHCO3处理
  内容： 实验1—Ca2+、H+、K+流速 检测样品：拟南芥 检测部位：根部伸长区—老师写的是成熟区（距离根冠1000 μm以上） 检测样品品种：WT、HA12#17、HA12#58、HA16#3、HA16#4、HA24#13、HA24#14 处理方式：无处理（对照）、7 mM 的NaHCO3处理24 h-48h（时间点不确定，暂定24和48h） 重复数：8 检测指标：Na+、H+、K+ 具体方案 对照组、7mM NaHCO3胁迫24h、48h后定点检测5 min 目的：观察NaHCO3长时处理效应，比较植物耐碱胁迫的能力 参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/jgVHMzXIJp8mEvsuT6Ny3w https://mp.weixin.qq.com/s/hoDMtVPbC0jxqVZnvs7kRA ...
• 实验设计: 拟南芥保卫细胞瞬时ABA
  内容： 材料：拟南芥 基因型：WT、突变体 检测部位：保卫细胞 检测指标：Ca2+ 处理：10μM ABA实时处理 具体方案： WT：10μM ABA处理前检测5min，10μM ABA处理后检测20min（3个重复，用于确定信号变化比较大的时间段） 10μM ABA处理前检测5min，10μM ABA处理后检测10min（5个重复，假如根据上面的三个重复确定数据在加药后10min可以稳定，则之后的样品都检测10min） 突变体：10μM ABA处理前检测5min，10μM ABA处理后检测10min（8重复）   ...
• 设备操作: 如何确定根尖位置的最大流速？
  内容： 确定根尖最大流速的位置，常用方法是扫点实验，比如：在根冠、在距离根冠300um、500um、800um……位置分别检测 3～5分钟，6-8个生物学重复，作比较即可。 ...
• 实验设计: 玫瑰根盐胁迫
  内容： 一、材料：玫瑰 二、处理：对照、3%NaCl、5%NaCl 三、检测指标：Na+，K+ 四、检测部位：根分生区 五、具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的根部Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，根部吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录5分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物根部排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），移至测试液中放置20分钟后检测，记录5分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+） 【目的：查看盐胁迫下，植物根保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下根部排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测 b.置于盐溶液中处理6、12、24、48h后（时间点可以调整），直接检测，记录5分钟，8重复/组 ...
• 实验设计: 马铃薯根预处理
  内容： 检测样品：马铃薯 基因型：高积累、低积累 检测部位：根伸长区、茎维管束 处理：50μM CdCl2处理6h、48h 检测指标：Ca2+、Cd2+、H+ 具体实施方案： 50μM CdCl2处理6h、48h后，定点检测10分钟，8重复/组 ...
• 实验设计: 蓝藻NO3-化感物质黄铜处理
  内容： 材料：蓝藻 检测指标：NO3- 检测位点：蓝藻细胞定点检测 实验目的：蓝藻在化感物质（黄酮）的胁迫下，硝酸盐的吸收是否受到影响 具体方案 1）实时处理 目的：黄酮实时处理后，NO3-的信号变化相对较强，有利益观察不用处理间的差异 0.1mM黄酮实时处理 方案：瞬时处理前检测3min，瞬时处理后检测10分钟，现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如15min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到15min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。 2）预处理 目的：观察NO3-长时处理效应 对照，0.1mM黄酮、0.5mM黄酮处理24h 对照，0.1mM黄酮处理6h、24h 方案：处理后检测3min（a、b处理方式均适用）。 六、参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/VSGIRPkre9xckMPdidEwjg ...
• 实验设计: 花花柴根Na、K盐胁迫
  内容： 【方案一：NaCl浓度递增处理】 材料：花花柴 处理：0、100、200、300、400mM NaCl以递增的方式添加，直到添加到400mM NaCl后，再处理24h。 检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区 具体方案： Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理24h后，记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+） 【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测（即100、200、300、400mM NaCl瞬时处理，处理前检测5min，NaCl处理后检测10min） b.置于盐溶液中处理24h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组     【方案二：NaCl直接处理，可能植物有应激反应，但是不会影响离子流速的变化】 材料：花花柴 处理：0、100、200、300、400mM NaCl处理6/12/24/48h后（时间点可以调整） 检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区 具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录0分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+） 【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测（即100、200、300、400mM NaCl瞬时处理，处理前检测5min，NaCl处理后检测10min） b.置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），直接检测，记录10分钟，8重复/组 ...
• 实验设计: 枸杞、番茄根叶肉Na、K盐胁迫
  内容： 材料：枸杞、番茄 基因型：WT、转基因 处理：100mM NaCl（浓度可调整） 检测指标：Na+，K+ 检测部位：根分生区、叶肉细胞 具体方案： Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录5分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理6/12/24/48h后（时间点可以调整），记录5分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+） 【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组 2）盐胁迫组 a.盐胁迫后，立即检测 b.置于盐溶液中处理6、12、24、48h后（时间点可以调整），直接检测，记录5分钟，8重复/组 ...
• 实验设计: 根、中柱、茎 Cd
  内容： 一、材料：WT、OE、RNAi 二、处理： 1）20 μmM CdCl2瞬时处理（可测根成熟区、根中柱、茎木质部） 目的：Cd实时处理后，Cd2+吸收和H2O2的信号相对较强，有利益观察不用材料间的差异 2）20 μmM CdCl2处理5d（可测根成熟区） 目的：观察Cd长时处理效应 三、检测指标：Cd2+ 四、检测位点：根成熟区、根中柱、茎木质部 五、具体实验细节： 1、Cd2+ 1）瞬时实验：20 μmM CdCl2处理前检测5min，20 μmM CdCl2实时处理后处理后检测10min 2）预处理实验：20 μmM CdCl2处理5d后，检测10分钟稳定数据即可 六、重复数：8 七、参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/ghdDSYJqyha59A5_BYFCJg ...
• 实验设计: 柑橘砧木、枳根 Al+B
  内容： 一、材料：柑橘砧木、枳 二、检测指标：H+ 三、检测位点：根成熟区 四、重复：8 五、处理 1）低B（10μM硼，0μM铝） 2）低B+Al（10μM硼，300μM铝）  3）高B（50μM硼，0μM铝） 4）高B+Al（50μM硼，300μM铝） 六、具体方案 实验1：检测排H+速率（Al预处理3h） 目的：观察硼缓解铝毒的长时处理效应 a）低B/高B处理2d（时长可调整），检测5min数据 b）低B/高B处理2d（时长可调整），加入Al处理3h（时长可调整）后，检测5min数据 c）备注：上述方案是B预处理后Al处理（参考PP文章），如有需要，也可以选择B和Al同时处理的方式。 实验2：检测根表H+浓度/pH值（Al预处理3h） 目的：观察B处理后，Al胁迫下根表pH值的变化（NMT可以测根表pH） 具体方案：与实验1一致 实验3：检测Al实时处理后的排H+速率 目的：根据经验，Al实时处理后，H+的信号变化相对较强，有利于观察不用处理间的差异 a）低B/高B处理2d（时长可调整），检测5min数据（如果做了实验1，这个可以不做），实时加入300μM铝试剂，立即持续检测10min数据。 b）实时加入铝试剂后的检测时长，暂定10min，现场会根据前2个样品的实际信号变化情况，优化实时处理后的检测时长。例如10min后信号还在持续变化，则延长实时处理后的检测时长；如不到10min信号已经处于稳定期，则缩短实时处理后的检测时长。 七、参考文献 https://mp.weixin.qq.com/s/Rfl3Cmhf4HmhI7WNA-v6Mg ...
• 实验设计: 白菜根盐胁迫
  内容： 实验一 材料：大白菜 基因型/品种：自交系A03 检测部位：根分生区（H+）、根成熟区（Cd2+） 检测指标：H+（流速、根表pH）、Cd2+（流速） 处理： CK 200mM NaCl处理 2d 具体方案： H+、Cd2+ 200mM NaCl处理2d后，定点检测10分钟在，8重复/组 实验二：离子浓度成像检测 一、材料：大白菜 二、基因型/品种：自交系A03 三、检测部位：根分生区 四、检测指标：H+ 五、处理： CK 200mM NaCl处理 2d     材料：大白菜 基因型：自交系A03 检测部位：根分生区（过渡区中点） 检测指标：Ca2+、Na+、K+、Cl- 处理： CK 200mM NaCl处理 2d 具体方案： Ca2+预处理200mM NaCl处理6h后（处理时间可调整，因为Ca2+变化较快，所以盐处理时间比较短，处理2天时间较长可能信号变化不明显），定点检测10分钟，8重复/组 Ca2+实时处理200mM NaCl处理前检测5分钟，200mM NaCl处理10分钟后检测15-20分钟（经费允许可以持续检测30分钟），8重复/组 Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐碱胁迫下，谁的Na+进入的少】一般来说，耐盐碱材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）胁迫组a.置于200mM NaCl中处理0.5/1/2h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组 Na+外排（测Na+）【目的：查看盐碱胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐碱材料的耐受机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组2）胁迫组置于200mM NaCl中处理2d后（时间点可以调整），记录10分钟，8重复/组 K+吸收/外排（测K+） 【目的：查看盐碱胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐碱胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐碱材料，胁迫下排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组 2）胁迫组 200mM NaCl胁迫后，立即检测 b.置于200mM NaCl中处理48h后（时间点可以调整），直接检测，记录10分钟，8重复/组 6. Cl-方案参考Na+ ...
• 实验设计: 油菜根低温瞬时
  内容： 材料：两个油菜品种 检测指标：Ca2+ 检测部位：根尖分生区（分生区Ca2+信号最明显） 处理：对照、实时0℃低温处理 对照：油菜正常状态下的Ca2+信号变化 实时0℃低温处理：检测完正常状态下的Ca2+信号变化后，实时把检测环境变成0℃，检测时间不少于15分钟（根据实验的实际情况决定检测时长，以实际检测到的稳定Ca2+信号时间为准） ...
• 实验设计: 烟草根盐低温干旱
  内容： 材料：烟草 基因型/品种：PBI121-GFP、PBI121-2.1GFP、PBI121-2.2GFP 检测位点：根分生区   【实验目的】前期的实验是看到了基因可以增强植物的抗逆性，现在想用NMT再验证一下 方案一：预处理—利于观察离子转运的长时效应 【盐胁迫—预处理】 检测指标：Na+、K+ Na+吸收（测Na+）目的：查看盐胁迫下，谁的根部Na+进入的少。一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，根部吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录3分钟，6重复/组2）盐胁迫组a.置于250mM盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组 Na+外排（测Na+）目的：查看盐胁迫下，两种植物根部排Na+能力的差异。这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强。1）对照组置于测试液中检测，记录3分钟，6重复/组2）盐胁迫组置于250mM盐溶液中处理12h后检测，记录3分钟，6重复/组 K+外排/吸收（测K+） 目的：查看盐胁迫下，植物根保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少。一般来说，耐盐材料，盐胁迫下根部排K+更少 1）对照组 置于测试液中检测，记录5分钟，6重复/组 2）盐胁迫组 置于盐溶液中处理12h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组 【干旱胁迫—预处理】 检测指标：Ca2+、H+ 具体方法：10% PEG处理12h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组 【低温胁迫—预处理】 检测指标：Ca2+ 具体方法：4℃低温处理12h后，直接检测，记录3分钟，6重复/组 方案二：瞬时处理—根据经验，实时处理后，离子转运信号变化相对较强，利于观察不用处理间的差异。 【盐胁迫—瞬时处理】 检测指标：Na+、K+ 具体方法 Na+250mM NaCl处理前定点检测3min，250mM NaCl处理前处理后定点检测10min，6重复/组 K+ 250mM NaCl处理前定点检测3min，250mM NaCl处理前处理后定点检测10min，6重复/组 【干旱胁迫—瞬时处理】 检测指标：Ca2+、H+ 具体方法：10% PEG处理前定点检测3min，10% PEG处理后定点检测10min，6重复/组 【低温胁迫—瞬时处理】 检测指标：Ca2+ 具体方法：4℃低温处理前定点检测3min，4℃低温处理后定点检测10min，6重复/组   方案三 材料：烟草 基因型/品种：PBI121-GFP、PBI121-2.1GFP、PBI121-2.2GFP 三、检测位点：根分生区（过渡区中点） 【实验目的】前期的实验是看到了基因可以增强植物的抗逆性，现在想用NMT再验证一下 【盐胁迫—预处理】 检测指标：Na+、K+ 具体方法：150mM NaCl处理24h后，定点检测5min，8重复/组 【干旱胁迫—实时处理】 检测指标：Ca2+、K+ 具体方法： Ca2+实时处理：15% PEG处理前检测5分钟，15% PEG处理检测10min，8重复/组 K+预处理：15% PEG处理5h后，定点检测5min，8重复/组 【低温胁迫—实时处理】 检测指标：Ca2+、K+ 具体方法： Ca2+实时处理：4℃低温处理前检测5分钟，4℃低温处理后检测10min，8重复/组 K+预处理：4℃低温处理5h后，定点检测5min，8重复/组 测试液： 盐胁迫测Na+：1mM NaCl，0.1mM CaCl2，pH6.0盐胁迫测K+：150mM NaCl，0.1mM CaCl2，0.1mM KCl，pH6.0 干旱胁迫测Ca2+、K+瞬时加药前：0.5mM CaCl2，0.5mM KCl，pH6.0瞬时加药后/预处理：15% PEG，0.5mM CaCl2，0.5mM KCl，pH6.0 低温胁迫测Ca2+、K+：0.1mM CaCl2，0.1mM KCl，pH6.0 ...
• 实验设计: 烟草铵硝扫点定点
  内容： 材料：烤烟 基因型/品种：1个对照、2个过表达株系、2个RNAi株系 检测指标：NH4+、NO3- 检测位点：根 【实验目的】分析不同氨基酸转运蛋白NtTAT（WT、OE、RNAi）NO3-和NH4+在膜上外排和内流的速率，检测氨基酸转运蛋白NtTAT是否直接影响了NO3-和NH4+氮素。 （这是第一步实验，目的是想看烟草对铵硝的偏好性，老师预期是对硝偏好性大一些） 重复：6 【具体方案】 扫点实验：对照样品选取4个重复进行扫点实验，具体检测位点 NH4+：300μm（分生区）、800μm（分生区/伸长区）、1500μm（伸长区/成熟区）、7500μm（成熟区），每个点检测3min NO3-：800μm（分生区/伸长区）、1500μm（伸长区/成熟区）、2500μm（伸长区）、5000μm（成熟区）、7500μm（成熟区），每个点检测3min 定点实验：根据扫点实验结果，选择NH4+、NO3-吸收/差异最大的点进行定点实验，每个点检测5min     材料：烤烟 基因型/品种：1个对照、2个过表达株系、2个RNAi株系 三、检测指标：NO3- 四、检测位点：根 【实验目的2】检测WT、OE、RNAi在不同浓度NO3-（0、0.1%、0.3%）下处理下氨基酸转运蛋白NtTAT（WT、OE、RNAi）中NO3-流速，探讨过表达氨基酸转运蛋白NtTAT材料是否耐更高浓度氮素 四、重复：8 【具体方案】 不同浓度NO3-处理3天后（时间点可根据实际情况调整），定点检测5min     材料：烤烟 基因型/品种：1个对照、2个过表达株系、2个RNAi株系 三、检测指标：NO3- 四、检测位点：根 【实验目的3】分析氨基酸转运蛋白NtTAT（WT、OE、RNAi）利用不同浓度（假设两个浓度：高、低）的能量阻断剂处理下在合适的NO3­浓度下（0、0.1%）氨基酸转运蛋白NtTAT是否存在依靠能量转运。 四、重复：8 【具体方案】 高、低浓度的能量阻断剂处理3天后（时间点可根据实际情况调整），定点检测5min ...

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