盐
- 盐胁迫Na+吸收实验体系标准
一、材料：拟南芥
二、基因型：WT、转基因1、转基因2
三、处理：200mM NaCl处理
四、检测指标：Na+
五、检测部位：根分生区（过渡区中间）
六、具体方案：
Na+吸收（测Na+）
【目的：查看盐胁迫下，谁的Na+进入的少】
一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，吸Na+速率更小。
1）对照组
置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组
2）盐胁迫组
a.置于200mM NaCl中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组
（例如：200mM NaCl处理半小时，测试液50mM NaCl，0.1mM CaCl2，pH6.0，不需要平衡，放入测试液中直接开始测）
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- 盐胁迫K+外排实验体系标准
一、材料：拟南芥
二、基因型：WT、转基因1、转基因2
三、处理：200mM NaCl处理24h
四、检测指标：Na+，K+
五、检测部位：根分生区（过渡区中间）
六、具体方案：
【目的：查看盐胁迫下，植物保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】 一般来说，耐盐材料，盐胁迫下排K+更少
1）对照组 置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组
2）盐胁迫组
a. 200mM NaCl胁迫后，立即检测（200mM NaCl实时处理）
b.置于200mM NaCl中处理24h后，直接检测，记录10分钟，8重复/组（200mM NaCl预处理24h）
注意：测K+直接在胁迫浓度里测即可，例如测试液：200mM NaCl，0.1 mM KCl，0.1mM CaCl2，pH6.0
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- 盐胁迫Na+外排实验体系标准
一、 材料：拟南芥
二、 基因型：WT、转基因1、转基因2
三、 处理：200mM NaCl处理24h
四、 检测指标：Na+
五、 检测部位：根伸长区
六、 具体方案：
【目的：查看盐胁迫下，两种植物排Na+能力的差异】
1）对照组
置于测试液中检测，记录10分钟，8重复/组
2）盐胁迫组
置于200mM NaCl中处理24h后，记录10分钟，8重复/组
测试液：0.5mM NaCl，0.1mM CaCl2，pH6.0
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- 盐胁迫+硝酸铵
执行方案 第一阶段
材料：耐盐，不耐盐
处理：对照（正常培养），盐，盐+硝酸铵
检测指标：钠，钾
具体方案：
1.钠外排（测Na+）
【目的：查看硝酸铵处理是否能促进盐胁迫下，棉花根排Na+速率】
材料：对照组（正常培养的2种样品）
1）对照组
置于-硝酸铵-盐测试液中，平衡20分钟后检测伸长区（+代表有，-代表无），记录3分钟，8重复/组
b.置于+硝酸铵-盐测试液中，平衡20分钟后检测伸长区，记录3分钟，8重复/组
2）处理组
a.置于-硝酸铵+盐（150 mM NaCl）培养液中处理12小时后，移至-硝酸铵-盐测试液中平衡20分钟，检测伸长区，记录5分钟，8重复/组
b.置于+硝酸铵+盐培养液（20 mM NH4NO3，150 mM NaCl）中处理12小时后，移至+硝酸铵-盐测试液中平衡20分钟，检测伸长区，记录5分钟，8重复/组
3）溶液配方
-硝酸铵-盐测试液：0.5 NaCl，pH 6.0
+硝酸铵-盐测试液：20 NH4NO3，0.5 NaCl，pH 6.0
2.钠吸收（测Na+）
【目的：查看硝酸铵处理是否能抑制盐胁迫下，棉花根的吸Na+速率】
材料：对照组（正常培养的2种样品）
1）对照组
置于-硝酸铵-盐测试液中检测
b.置于+硝酸铵-盐测试液中检测
2）处理组
a.置于-硝酸铵+盐处理液中处理20分钟后，置于改良-硝酸铵+盐测试液中，2分钟后直接检测，记录5分钟，8重复/组
b.置于+硝酸铵+盐处理液中处理20分钟后，置于改良+硝酸铵+盐测试液中，2分钟后直接检测，记录5分钟，8重复/组
3）溶液配方
-硝酸铵-盐测试液：0.5 NaCl，pH 6.0
+硝酸铵-盐测试液：20 NH4NO3，0.5 NaCl，pH 6.0
改良-硝酸铵+盐测试液：75 mM NaCl，pH 6.0（7.5/75 mM NaCl，pH 6.0作为高低校正液，斜率符合要求即可）
改良+硝酸铵+盐测试液：20 NH4NO3，75 mM ...
- 盐胁迫
材料：样品A、样品B、样品C
处理方式：盐胁迫12h（互为对照）
检测位点：定点检测，根分生区
重复数：8
具体方案
Na+吸收（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，谁的根部Na+进入的少】一般来说，耐盐材料在盐胁迫下，根部吸Na+速率更小。1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组a.置于盐溶液中处理0.5/1/2 h后，直接检测，记录5分钟，8重复/组
Na+外排（测Na+）【目的：查看盐胁迫下，两种植物根部排Na+能力的差异】这里已经是更进一步地去发现耐盐材料的耐盐机制，是不是根部排Na+能力更强1）对照组置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组2）盐胁迫组置于盐溶液中处理12h后（时间点可以调整），移至测试液中放置20分钟后检测，记录5分钟，8重复/组
K+外排/吸收（测K+）
【目的：查看盐胁迫下，植物根保K+能力，也就是哪种植物在盐胁迫下排出去的K+更少】
一般来说，耐盐材料，盐胁迫下根部排K+更少
1）对照组
置于测试液中检测，记录5分钟，8重复/组
2）盐胁迫组
a.盐胁迫后，立即检测
b.置于盐溶液中处理12h后（时间点可以调整），直接检测，记录5分钟，8重复/组
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- 盐腺的测试方法是在上方还是侧方。
两种方法都可以，但是要看待测细胞的位置方便哪种方式的检测。
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