• 中国农科院:NMT结合CRISPR / Cas9技术验证OsMPT3调节离子平衡促植物耐盐 | NMT农作物耐盐创新科研平台
    基本信息 主题:NMT结合CRISPR / Cas9技术验证OsMPT3调节离子平衡促植物耐盐 期刊:The Crop Journal 研究使用平台:NMT农作物耐盐创新科研平台 标题:Mutagenesis revealsthat the rice OsMPT3 gene is an important osmotic regulatory factor 作者:中国农业科学院农业资源与农业区划研究所程宪国、黄升财       检测指标 Na+、K+、Ca2+       检测样品 水稻根根毛区(距根尖10mm的根表上的点)   离子流实验处理方法     将2周龄幼苗(WT和突变体)置于含有120mmol·L-1NaCl的霍格兰营养液中24h。   离子流结果     当幼苗在适宜的培养液中生长时,mpt30突变体和WT在根尖伸长区的Na+流速呈现出相似的变化趋势,但mpt30突变体在8.5min后表现出比WT更低的Na+外排量(图a)。当幼苗在120mmol·L-1NaCl溶液中暴露时,mpt30突变体和WT均表现出逐渐增加的Na+外排趋势,但与WT相比,突变体在根尖伸长区的Na+外排速率显著降低(图b)。与Na+相比,突变体和WT在良好的培养条件下都表现出K+在伸长区的内流,并且突变体的K+内流速率明显高于WT(图c)。盐胁迫下,mpt30突变体的K+流速由内流转化为外排,而WT中K+的内流速率逐渐降低,并在9min后表现出明显的外排(图d)。当水稻幼苗在适宜的溶液中生长时,突变体和WT都表现出随时间逐渐减少的Ca2+外排,但是mpt30突变体显示出相对于WT显著增加的Ca2+外排速率(图e)。盐胁迫下,突变体和WT的Ca2+流速分布呈现相似的趋势,mpt30和WT的Ca2+外排速率均显著高于良好培养(图f)。 无论是在适宜培养还是盐胁迫下,mpt30突变体的根尖Na+净流速均显著低于WT。在良好培养条件下,突变体中Na+的平均外排量下降了76.7%,在盐胁迫下下降了60.2%(图g)。与Na+相反,在良好培养条件下,K+呈内流趋势,突变体的平均K+内流速率高于WT。然而,在盐胁迫下,WT中的K+呈现内流,而mpt30突变体则表现出K+外流(图h)。盐胁迫增加了突变体和野生型水稻的Ca2+外流;然而,无论是在适宜条件下培养还是在NaCl胁迫下,mpt30突变体的Ca2+净外排量都比WT净外排量高(图i)。 ...
  • 中国林科院张华新、杨秀艳:NMT发现白刺通过维持叶肉排Na+保K+能力及H+泵活性来适应盐胁迫
    基本信息 主题:NMT发现白刺通过维持叶肉排Na+保K+能力及H+泵活性来适应盐胁迫 期刊:Tree Physiology 影响因子:3.655(2020年) 研究使用平台:NMT植物耐盐创新平台 标题:Tissue tolerance mechanisms conferring salinity tolerance in a halophytic perennial species Nitraria sibirica Pall. 作者:中国林科院国家林业和草原局盐碱地研究中心张华新、杨秀艳、唐晓倩、张会龙   检测离子/分子指标 K+、Na+、H+   检测样品 西伯利亚白刺叶肉组织   中文摘要 植物的耐盐性依赖于不同组织和器官的协调运转。组织耐盐性是赋予植物适应盐环境的关键性状之一。这一特性意味着在代谢活跃的细胞中能够维持较低的胞质Na+/K+比值。本研究以多年生木本盐生植物西伯利亚白刺(Nitraria sibirica)为材料,探讨其耐盐性机制。结果表明,100~200 mM NaCl处理刺激了幼苗的生长。离子分布结果表明,叶片起到Na+库的作用,而植物根系具有优越的保K+能力。从土壤中吸收的过量Na+主要转运到地上部分,最终被区隔在叶肉细胞的液泡中。因此,在盐胁迫下西伯利亚白刺能够在组织和细胞水平上特异性保持K+/Na+的最适平衡。为此,西伯利亚白刺叶肉细胞中液泡H+-ATPase和H+-PPase酶活性升高, NsVHA、NsVP1和NsNHX1基因的表达上调。NsVHA、NsVP1和NsNHX1介导的叶肉液泡Na+区隔化降低了细胞质中Na+浓度,抑制了K+的流失。同时,西伯利亚白刺在转录水平上调TPK的表达,促进K+从液泡向细胞质转移,有助于维持细胞质中K+稳态。综上表明,西伯利亚白刺的液泡Na+区隔化和细胞内K+稳态等组织耐受特性对西伯利亚白刺适应土壤盐渍化具有重要作用。   离子/分子流实验处理 0、200和400 mM NaCl处理24 h   离子/分子流实验结果 采用非损伤微测技术(NMT)检测了西伯利亚白刺叶肉细胞Na+、K+和H+的稳定流速。盐胁迫诱导叶肉Na+和K+净外排速率呈剂量依赖性增加(图1A-D)。同时,盐处理导致H+净外排速率呈剂量依赖性增加(图1E, F),可作为PM H+-ATPase活性的一个体现。 图1. 西伯利亚白刺幼苗叶片叶肉细胞内Na+、K+和H+的净流速。正值代表Na+、K+和H+外排,负值代表Na+、K+和H+吸收。   其他实验结果 NaCl浓度在100~200 mM时对西伯利亚白刺幼苗的生长有刺激作用,超过300 mM时则产生抑制作用。 NaCl处理后西伯利亚白刺幼苗叶片、茎和根中的Na+含量以剂量依赖性方式增加;随着NaCl浓度的增加,叶中K+含量下降,但根中K+含量有所增加;随着胁迫严重程度和时间的增加,幼苗3个组织的K+/Na+比值均有所下降。各处理下,根部的K+/Na+比最高,叶片最低。 盐处理诱导了叶肉细胞Na+积累。 NaCl胁迫显著提高了液泡膜H+-ATPase和H+-PPase的活性,且活性呈时间依赖性增加。各时间点PM H+-ATPase活性均低于液泡膜H+-ATPase活性。 采用RT-qPCR测定了6个参与Na+和K+运输的基因表达。盐胁迫显著增加了大部分目标基因的表达,在400 ...
  • 中科院东北地理所、大连民大:NMT发现耐盐系苜蓿愈伤组织排Na+更强 为海水灌溉育种研究提供新手段
    基本信息 主题:NMT发现耐盐系苜蓿愈伤组织排Na+更强 为海水灌溉育种研究提供新手段 期刊:Pakistan Journal of Botany 研究使用平台:NMT植物耐盐创新平台 标题:Identification of Short-Term Na+ Secretion In Salt Tolerant Cell Line From Alfalfa Callus Cultures Selected On Half-Natural Seawater Medium 作者:中科院东北地理与农业生态研究所魏红旭、大连民族大学郭鹏   检测离子/分子指标 Na+   检测样品 紫花苜蓿根,距根尖500 μm   中文摘要(谷歌机翻) 海水灌溉对沿海农业发展至关重要,但愈伤组织培养植物株系耐盐响应海水的关键机制仍不清楚。本研究以紫花苜蓿(Medicago sativa)的下胚轴愈伤组织为研究对象。将Gongnong 2号培养成M0亲本,10代后,在半天然海水中筛选EMS诱导的耐盐系Ms1(采自大连市泊石湾)。比较了M0和Ms1再生苗对50%、30%、10%和0%(对照)海水比例的耐盐性差异。不同愈伤组织培养系和海水处理的因素对地上部分高(长)和Na+积累、气孔导度(SC)、叶片叶绿素含量没有交互作用。对于这两个株系而言,对照和10%的海水处理下根长、地上部生物量和气孔密度(SD)都较大,而MDA和脯氨酸含量较少。与M0株系相比,Ms1株系的耐盐性相对较高,主要是干物质对根系的分配较少,SD和SC下降,控制了地上部Na+的积累,但叶绿素含量和膜保护能力增强。通过非损伤微测技术(NMT)获得的结果表明,在前1.5分钟内,Ms1株系根中的净Na+流速显示出最高的速率和显著的外排模式,而 M0株系中出现了一些Na+内流。综上所述,通过筛选耐盐愈伤组织,海水灌溉在沿海紫花苜蓿生长发育中具有一定的应用潜力。根系Na+外排是决定其耐海水盐度的一个重要参数。   离子/分子流实验处理 在250 ...