拟南芥根PEG

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2022-07-19 04:31
  1. 材料:拟南芥
  2. 基因型:WT、OE1、OE2、RNAi
  3. 检测部位:根分生区(过渡区中点)
  4. 检测指标:Ca2+、Na+、K+、Cl-
  5. 处理:
  1. 150mM NaCl
  2. 145mM NaCl+5mM Na2CO3
  3. 10%PEG6000
  1. 具体方案:
  1. Ca2+预处理
    150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理6h后(处理时间可调整),定点检测10分钟在,8重复/组
  2. Ca2+实时处理
    150mM NaCl、145mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理前检测5分钟,150mM NaCl、145mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG处理10min后检测15-20分钟(经费允许可以持续检测30分钟),8重复/组
  3. Na+吸收(测Na+)
    【目的:查看盐碱胁迫下,谁的Na+进入的少】
    一般来说,耐盐碱材料在盐胁迫下,吸Na+速率更小。
    1)对照组
    置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组
    2)胁迫组
    a.置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3中处理0.5/1/2h后,直接检测,记录10分钟,8重复/组
  4. Na+外排(测Na+)
    【目的:查看盐碱胁迫下,两种植物排Na+能力的差异】
    这里已经是更进一步地去发现耐盐碱材料的耐受机制,是不是根部排Na+能力更强
    1)对照组
    置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组
    2)胁迫组
    置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3中处理6/12/24/48h后(时间点可以调整),记录10分钟,8重复/组
  5. K+吸收/外排(测K+)

【目的:查看盐碱胁迫下,植物保K+能力,也就是哪种植物在盐碱胁迫下排出去的K+更少】

一般来说,耐盐碱材料,胁迫下排K+更少

1)对照组

置于测试液中检测,记录10分钟,8重复/组

2)胁迫组

  1. 150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG胁迫后,立即检测

b.置于150mM NaCl、145 mM NaCl+5mM Na2CO3、10%PEG中处理6、12、24、48h后(时间点可以调整),直接检测,记录10分钟,8重复/组

6. Cl-方案参考Na+

标签: Ca2+, Cl-, K+, Na+, Na2CO3, NaCl, PEG, 拟南芥, 拟南芥根
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